GB 5009.154-2016檢測機構(gòu) 食品中維生素B6的測定 第一法 高效液相色譜法檢測
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GB 5009.154-2016《食品安全國家標準 食品中維生素 B6 的測定》第一法為高效液相色譜法。具體如下：
適用范圍：適用于添加了維生素 B6 的食品測定。
原理：試樣經(jīng)提取等前處理后，經(jīng) C18 色譜柱分離，高效液相色譜 - 熒光檢測器檢測，外標法定量測定維生素B6（吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺）的含量。
試劑和材料：所用試劑均為分析純，水為 GB/T 6682 規(guī)定的一級水。需準備維生素 B6標準品（吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺）、、甲醇、乙酸銨等，以及淀粉酶（若試樣含淀粉）。
儀器和設(shè)備：主要有高效液相色譜儀（配備熒光檢測器）、分析天平、離心機、超聲波清洗器、恒溫水浴鍋等。
分析步驟：
試樣制備：根據(jù)試樣類型，稱取適量樣品。含淀粉的試樣，需加入淀粉酶于適宜溫度下水浴酶解；不含淀粉的試樣，直接加入提取液，超聲提取后，離心取上清液，必要時過濾或稀釋，得到試樣溶液。
標準曲線制備：將維生素 B6標準品配制成系列濃度的標準工作液，注入高效液相色譜儀，以熒光檢測器檢測，記錄色譜峰面積。以標準工作液濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。
試樣測定：將試樣溶液注入高效液相色譜儀，按與標準曲線制備相同的色譜條件進行測定，記錄色譜峰面積，根據(jù)標準曲線計算試樣中維生素B6 各組分（吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺）的含量。
結(jié)果計算：根據(jù)標準曲線得到試樣溶液中維生素 B6 各組分的濃度，再根據(jù)試樣的稱樣量、稀釋倍數(shù)等，計算出試樣中維生素 B6各組分的含量，以 mg/100g 或 mg/L表示。計算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。
精密度：在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的差值不得超過算術(shù)平均值的 10%。
檢出限和定量限：當(dāng)取樣量為 5.00g 時，方法檢出限為吡哆醇 0.02mg/100g、吡哆醛0.02mg/100g、吡哆胺 0.02mg/100g；方法定量限為吡哆醇 0.05mg/100g、吡哆醛0.05mg/100g、吡哆胺 0.05mg/100g。
需注意，該標準已被 GB 5009.154-2023 代替。
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