適用范圍：適用于各種食品中維生素 A、D、E 的測定。

原理：
試樣經(jīng)皂化或直接提取后，用有機(jī)溶劑萃取維生素A、D、E，經(jīng)凈化（必要時）后，用高效液相色譜儀分離，紫外檢測器或熒光檢測器檢測，外標(biāo)法定量。

維生素 A、E 在紫外區(qū)有吸收，可通過紫外檢測器（維生素 A 檢測波長 325nm，維生素 E 檢測波長292nm）測定；

維生素 D 可通過紫外檢測器（265nm）或熒光檢測器（激發(fā)波長 265nm，發(fā)射波長315nm）測定，熒光法靈敏度更高。

主要步驟：

脂溶性較高的樣品（如油脂、奶油等）可直接用正己烷提??；

含脂量高或成分復(fù)雜的樣品（如肉類、乳制品等）需先皂化（加氫氧化鉀 -乙醇溶液，加熱回流），去除脂肪，再用正己烷萃取維生素。

注意事項：

維生素 A、D、E 易受光、熱、氧破壞，操作需避光，萃取和皂化過程需通入氮氣保護(hù)。

維生素 D 含量低時，可通過皂化后濃縮、凈化提高檢測靈敏度。

適用范圍：適用于維生素 A 含量較高的食品（如奶油、魚肝油等），不適用于含類胡蘿卜素較多的樣品（易干擾）。

原理：維生素 A 在中與三氯化銻反應(yīng)生成藍(lán)色配合物，在 620nm 波長處有Zui大吸收，吸光度與維生素 A含量成正比，通過比色測定。

主要步驟：

局限性：易受類胡蘿卜素、膽固醇等物質(zhì)干擾，準(zhǔn)確度較低，目前應(yīng)用較少。

適用范圍：適用于食品中總維生素 E（生育酚和生育三烯酚總量）的測定。

原理：維生素 E 具有熒光特性，在正己烷中，α- 生育酚的激發(fā)波長為 295nm，發(fā)射波長為330nm，熒光強(qiáng)度與含量成正比，通過熒光分光光度計測定。

主要步驟：

特點：操作簡便，靈敏度高于紫外法，但需注意其他熒光物質(zhì)的干擾。

適用范圍：適用于各類食品中維生素 A、D、E的測定，尤其適用于低含量樣品（如嬰幼兒食品、保健食品），抗干擾能力強(qiáng)。

原理：試樣經(jīng)提取、凈化后，通過高效液相色譜分離，進(jìn)入質(zhì)譜檢測器，根據(jù)目標(biāo)物的質(zhì)荷比（m/z）進(jìn)行定性（保留時間 +特征離子對），內(nèi)標(biāo)法定量（常用氘代維生素作為內(nèi)標(biāo)，如維生素 D?-d?）。

優(yōu)勢：

特異性強(qiáng)，可有效區(qū)分結(jié)構(gòu)相似的同系物（如維生素 D?與 D?、不同生育酚異構(gòu)體）。

靈敏度高，檢出限低（維生素 D 可達(dá) ng/kg 級別），適用于微量分析。

應(yīng)用場景：常用于復(fù)雜基質(zhì)樣品或低含量樣品的精準(zhǔn)檢測，是目前國標(biāo)中推薦的高精度方法。

發(fā)布與實施時間：2016 年 8 月 31 日發(fā)布，2017 年 3 月 1 日實施，替代了原 GB/T5009.82-2003 等標(biāo)準(zhǔn)。

結(jié)果表示：維生素 A 以視黃醇當(dāng)量（μg RE）計，維生素 D 以 μg 計，維生素 E 以 α- 生育酚當(dāng)量（mgα-TE）計（不同生育酚活性不同，需換算）。