適用范圍：適用于食品中泛酸的測定。

原理：泛酸是植物乳桿菌 Lactobacillusplantarum（ATCC8014）生長所必需的營養(yǎng)素，在一定控制條件下，將植物乳桿菌液接種至含有試樣液的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)一定時間后測定透光率（或吸光度值），根據(jù)泛酸含量與透光率（或吸光度值）的標準曲線計算出試樣中泛酸的含量。

試劑和材料：所用試劑均為分析純，水為 GB/T 6682規(guī)定的二級水。需準備泛酸標準品、乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基、乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基、泛酸測定用培養(yǎng)液等，也可購買試劑公司效力相當?shù)姆核釡y定用培養(yǎng)基。

儀器和設備：包括高壓蒸汽滅菌鍋、恒溫培養(yǎng)箱、可見分光光度計或酶標儀等。

分析步驟：

儲備菌種的制備：將植物乳桿菌接種于乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基，在規(guī)定溫度下培養(yǎng)一定時間，然后保存于冰箱中。

接種液的制備：取儲備菌種，用乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基活化，再稀釋制成合適濃度的接種液。

標準曲線的制備：將泛酸標準品配制成一系列不同濃度的標準工作液，分別加入到泛酸測定用培養(yǎng)液中，接種植物乳桿菌接種液，培養(yǎng)后測定透光率（或吸光度值），以泛酸濃度為橫坐標，透光率（或吸光度值）為縱坐標，繪制標準曲線。

試樣處理：根據(jù)試樣類型，可選擇直接提取法或酶解法。直接提取法適用于某些簡單基質樣品，將試樣用合適的溶劑提取后，過濾備用；酶解法則適用于含有較多干擾物質或結合型泛酸的樣品，需先用酶進行水解，再提取過濾。

試樣測定：將處理后的試樣液加入到泛酸測定用培養(yǎng)液中，接種植物乳桿菌接種液，按照與標準曲線制備相同的條件培養(yǎng)，然后測定透光率（或吸光度值），根據(jù)標準曲線查得試樣中泛酸的含量。

結果計算：從標準曲線查得試樣和酶空白系列管中泛酸的相應含量，若試樣系列管中多數(shù)泛酸含量在規(guī)定范圍內，且各管之間相對偏差符合要求，則可根據(jù)公式計算試樣中泛酸含量。采用直接提取法的試樣中泛酸含量按公式\(X=\frac{\rhoV_1F}{m}\times\frac{100}{10^{6}}\)計算；采用酶解法的試樣中泛酸含量按公式\(X=\frac{(\rho_{x}-\rho_{0})V_1}{mV_2}\times\frac{V_5V_3F}{V_4}\times\frac{100}{10^{6}}\)計算。其中X為試樣中泛酸含量，\(\rho\)為試樣稀釋液泛酸濃度平均值，\(\rho_{x}\)為試樣酶解液中泛酸含量，\(\rho_{0}\)為酶空白液中泛酸含量，\(V_1\)、\(V_2\)等為不同步驟的體積，F(xiàn)為稀釋倍數(shù)，m為試樣質量。結果如以泛酸鈣計量，應乘以1.087。計算結果以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的算術平均值表示，結果保留三位有效數(shù)字。

精密度：一般食品在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的差值不得超過算術平均值的15%；營養(yǎng)素補充劑和強化食品在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的差值不得超過算術平均值的 5%。