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GB/T 23193-2017《茶葉中茶氨酸的測定 高效液相色譜法》保健食品茶氨酸檢測要點(diǎn)

重要前提:標(biāo)準(zhǔn)原文適用范圍僅為茶葉,并未覆蓋保健食品(片劑、膠囊、粉劑等制劑);但目前很多保健食品功效成分檢驗(yàn),會參照此HPLC方法,需要做方法驗(yàn)證(適用性、回收率、精密度、專屬性)后,方可用于保健食品注冊 /備案、型式檢驗(yàn),CMA 實(shí)驗(yàn)室必須完成方法確認(rèn)。

一、標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)信息

  • 標(biāo)準(zhǔn)號:GB/T 23193-2017

  • 中文名稱:茶葉中茶氨酸的測定 高效液相色譜法

  • 發(fā)布:2017-11-01;實(shí)施:2018-05-01;現(xiàn)行有效;替代舊版 GB/T23193-2008全國標(biāo)準(zhǔn)信...

  • 原理:樣品沸水提取,提取液過 0.45μm 濾膜,高效液相色譜紫外檢測器 210nm檢測,外標(biāo)法定量茶氨酸。無衍生,直接進(jìn)樣

  • 檢出限:5.0 mg/kg(茶葉基質(zhì))

  • 二、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的前處理(茶葉基質(zhì))

    1. 稱取 1.0g 粉碎樣品,加 100mL 沸水

    2. 水浴浸提 30min

    3. 冷卻、定容、取上清,過 0.45μm 水系濾膜,待測

    ??保健食品基質(zhì)差異:膠囊、壓片、復(fù)配粉劑(含輔料、其他功效成分)不能直接照搬茶葉前處理;需要優(yōu)化提取溶劑、超聲 /水浴條件、凈化步驟,消除輔料干擾,并做全套方法學(xué)驗(yàn)證。

    三、色譜條件(標(biāo)準(zhǔn))

  • 色譜柱:C18 反相柱,5μm,250mm×4.6mm

  • 流動相:純水(梯度洗脫)

  • 流速:0.5~1.0 mL/min

  • 柱溫:35℃±0.5℃

  • 檢測波長:210 nm(末端吸收,基線易受雜質(zhì)干擾,保健食品樣品要重點(diǎn)考察專屬性)

  • 進(jìn)樣量:10~20 μL

  • 四、保健食品使用該方法的風(fēng)險(xiǎn)與注意事項(xiàng)

    1. 標(biāo)準(zhǔn)適用范圍限制:申報(bào)保健食品功效成分檢測時,審評機(jī)構(gòu)會關(guān)注:GB/T23193原生僅茶葉,屬于參照方法,不是保健食品法定國標(biāo);部分審評專家會要求提供完整方法學(xué)驗(yàn)證資料(專屬性、線性、精密度、回收率、穩(wěn)定性)。

    2. 基質(zhì)干擾:保健食品含淀粉、微晶纖維素、其他氨基酸、植物提取物,210nm紫外容易有共流出雜質(zhì),必要時可更換色譜柱、增加凈化。

    3. 茶氨酸原料(茶葉來源茶氨酸單體粉):很多原料企標(biāo)直接引用 GB/T23193 作為原料檢驗(yàn)方法,原料檢測一般可直接采用。

    4. CMA 資質(zhì):實(shí)驗(yàn)室要在 CMA 附表中確認(rèn)該方法已擴(kuò)項(xiàng);若用于保健食品成品,屬于非標(biāo)適用,需要方法確認(rèn) /方法驗(yàn)證,并在報(bào)告中注明 “參照 GB/T 23193-2017,經(jīng)方法驗(yàn)證”。

    五、替代方案(保健食品茶氨酸功效成分)

  • 氨基酸分析儀法:適合復(fù)雜基質(zhì),抗干擾更強(qiáng),注冊申報(bào)認(rèn)可度高;

  • HPLC - 蒸發(fā)光散射檢測器;

  • LC-MS/MS:低含量樣品、確證用。

  • 六、常規(guī)檢測交付資料清單(保健食品)

    1. 方法驗(yàn)證報(bào)告(線性范圍、RSD、回收率、檢出限、定量限、專屬性圖譜)

    2. 標(biāo)準(zhǔn)品證書(L - 茶氨酸對照品)

    3. HPLC 色譜圖(空白、對照品、樣品、加標(biāo))

    4. CMA 檢測報(bào)告(注明方法參照情況)

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