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藥品中國藥典2015年版四部0513離子色譜法系采用高壓輸液泵系統(tǒng)將規(guī)定的洗脫液泵入裝有填充劑的色譜柱,對(duì)可解離物質(zhì)進(jìn)行分離測(cè)定的色譜方法。以下是對(duì)該方法的詳細(xì)介紹:

一、方法原理

在洗脫液的驅(qū)動(dòng)下,注入的供試品由洗脫液帶入色譜柱內(nèi)進(jìn)行分離,然后進(jìn)入檢測(cè)器(必要時(shí)經(jīng)過抑制器或衍生系統(tǒng)),Zui后由積分儀或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄并處理色譜信號(hào)。

二、應(yīng)用范圍

離子色譜法常用于無機(jī)陰離子、無機(jī)陽離子、有機(jī)酸、糖醇類、氨基糖類、氨基酸、蛋白質(zhì)、糖蛋白等物質(zhì)的定性和定量分析。

三、儀器要求

  1. 色譜柱:離子交換色譜的色譜柱填充劑有兩種,分別是有機(jī)聚合物載體填充劑和無機(jī)載體填充劑。

  2. 有機(jī)聚合物載體填充劑:Zui為常用,填充劑的載體一般為苯乙烯-二乙烯基苯共聚物、乙基乙烯基苯-二乙烯基苯共聚物、聚甲基丙烯酸酯或聚乙烯聚合物等有機(jī)聚合物。這類載體的表面通過化學(xué)反應(yīng)鍵合了大量陰離子交換功能基(如烷基季銨、烷醇季銨等)或陽離子交換功能基(如磺酸、羧酸、羧酸-膦酸和羧酸-膦酸冠醚等),可分別用于陰離子或陽離子的交換分離。有機(jī)聚合物載體填充劑在較寬的酸堿范圍(pH0~14)內(nèi)具有較高的穩(wěn)定性,且有一定的有機(jī)溶劑耐受性。

  3. 無機(jī)載體填充劑:一般以硅膠為載體。在硅膠表面化學(xué)鍵合季銨基等陰離子交換功能基或磺酸基、羧酸基等陽離子交換功能基,可分別用于陰離子或陽離子的交換分離。硅膠載體填充劑機(jī)械穩(wěn)定性好,在有機(jī)溶劑中不會(huì)溶脹或收縮。硅膠載體填充劑在pH2~8的洗脫液中穩(wěn)定,一般適用于陽離子樣品的分離。

  4. 洗脫液:離子色譜對(duì)復(fù)雜樣品的分離主要依賴于色譜柱中的填充劑,而洗脫液相對(duì)較為簡(jiǎn)單。分離陰離子常采用稀堿溶液、碳酸鹽緩沖液等作為洗脫液;分離陽離子常采用稀甲烷磺酸溶液等作為洗脫液。通過調(diào)節(jié)洗脫液pH值或離子強(qiáng)度可提高或降低洗脫液的洗脫能力;在洗脫液內(nèi)加入適當(dāng)比例的有機(jī)改性劑(如甲醇、乙腈等)可改善色譜峰峰形。制備洗脫液的水應(yīng)經(jīng)過純化處理,電阻率大于18MΩ·cm。使用的洗脫液需經(jīng)脫氣處理,常采用氦氣等惰性氣體在線脫氣的方法,也可采用超聲、減壓過濾或冷凍的方式進(jìn)行離線脫氣。

  5. 檢測(cè)器:

  6. 電導(dǎo)檢測(cè)器:是離子色譜常用的檢測(cè)器,主要用于測(cè)定無機(jī)陰離子、無機(jī)陽離子和部分極性有機(jī)物(如羧酸等)。離子色譜法中常采用抑制型電導(dǎo)檢測(cè)器,即使用抑制器將具有較高電導(dǎo)率的洗脫液在進(jìn)入檢測(cè)器之前中和成具有極低電導(dǎo)率的水或其他較低電導(dǎo)率的溶液,從而顯著提高電導(dǎo)檢測(cè)的靈敏度。

  7. 安培檢測(cè)器:包括工作電極、對(duì)電極和參比電極,是利用電活性物質(zhì)在工作電極表面發(fā)生氧化或還原反應(yīng),測(cè)量反應(yīng)時(shí)產(chǎn)生電流變化的檢測(cè)技術(shù)。其主要優(yōu)點(diǎn)是靈敏度高、選擇性好、響應(yīng)范圍寬,可以用于電導(dǎo)率響應(yīng)不靈敏或者紫外響應(yīng)較弱的有機(jī)物和無機(jī)物的檢測(cè)。直流安培檢測(cè)器可以測(cè)定碘離子(I?)、硫氰酸根離子(SCN?)和各種酚類化合物等;積分安培檢測(cè)器和脈沖安培檢測(cè)器則常用于測(cè)定糖類和氨基酸類化合物。

  8. 紫外檢測(cè)器:適用于在高濃度氯離子等存在下痕量的溴離子(Br?)、亞硝酸根離子(NO??)、硝酸根離子(NO??)以及其他具有強(qiáng)紫外吸收成分的測(cè)定。柱后衍生-紫外檢測(cè)法常用于分離分析過渡金屬離子和鑭系金屬離子等。

  9. 其他檢測(cè)器:如質(zhì)譜檢測(cè)器、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器等,也可用于離子色譜法中,但應(yīng)用相對(duì)較少。

四、樣品處理

對(duì)于基質(zhì)簡(jiǎn)單的澄清水溶液,一般通過稀釋和經(jīng)適宜孔徑的(≤0.45μm)濾膜過濾后直接進(jìn)樣分析。對(duì)于基質(zhì)復(fù)雜的樣品,可通過閥切換在線基體消除、微波消解、紫外光降解、固相萃取、燃燒法等方法去除干擾物后進(jìn)樣分析。

五、系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

照高效液相色譜法(通則0512)項(xiàng)下相應(yīng)的規(guī)定進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗(yàn),以確保色譜系統(tǒng)的分離效能、重復(fù)性等符合要求。

六、測(cè)定法

離子色譜法的測(cè)定法主要包括內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法、面積歸一化法等,具體內(nèi)容同高效液相色譜法(通則0512)項(xiàng)下相應(yīng)的規(guī)定。


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經(jīng)營(yíng)范圍

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     安徽量科檢測(cè)技術(shù)有限公司是一家一站式檢測(cè)服務(wù)中心,為企業(yè)及個(gè)人用戶提供低成本、高效率、更便捷的檢測(cè)服務(wù)。     主要提供的服務(wù)有:環(huán)境保護(hù)監(jiān)測(cè);生態(tài)資源監(jiān)測(cè);土地調(diào)查評(píng)估服務(wù);工程和技術(shù)研究和試驗(yàn)發(fā)展;醫(yī)學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;自然科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;農(nóng)業(yè)科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;終端計(jì)量設(shè)備銷售;計(jì)量技術(shù)服務(wù);標(biāo)準(zhǔn)化服務(wù);公路水運(yùn)工程試驗(yàn)檢測(cè)服務(wù);進(jìn)出口商品檢驗(yàn)鑒定;環(huán)保咨詢服務(wù);環(huán)境應(yīng)急治理服務(wù)許可項(xiàng)檢驗(yàn)檢測(cè)服務(wù);特種設(shè)備檢驗(yàn)檢測(cè);...

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