GB/T 20574-2006《蜂膠中總黃酮含量的測(cè)定方法 分光光度比色法》核心要點(diǎn)如下：
發(fā)布與實(shí)施：由國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局和中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)于2006年9月14日發(fā)布，2007年1月1日正式實(shí)施，將于2025年3月1日廢止。
適用范圍：適用于蜂膠（包括原始蜂膠、精制蜂膠及蜂膠的乙醇溶液）中總黃酮含量的測(cè)定，測(cè)定范圍涵蓋總黃酮含量在0.1%以上的蜂膠。
顯色反應(yīng)：溶于乙醇的黃酮類(lèi)化合物在弱堿性條件下，與顯色劑三價(jià)鋁離子結(jié)合生成有色物質(zhì)，該物質(zhì)在415nm波長(zhǎng)附近產(chǎn)生Zui大吸收。
定量依據(jù)：在一定濃度范圍內(nèi)，吸光度與黃酮類(lèi)化合物的含量成正比，通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較可定量測(cè)定總黃酮含量。
核心試劑：
乙醇（95%）：用于溶解蜂膠樣品。
硝酸鋁溶液（100g/L）：作為顯色劑。
醋酸鉀溶液（9.8g/L）：調(diào)節(jié)溶液pH值。
蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液：包括儲(chǔ)備液（1.0g/L）和使用溶液（0.2g/L），用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其他要求：所有試劑需為分析純，水為蒸餾水或去離子水。
可見(jiàn)分光光度計(jì)：用于測(cè)定吸光度。
減壓干燥箱：用于蘆丁對(duì)照品的干燥處理。
高速組織搗碎機(jī)：用于粉碎蜂膠樣品，轉(zhuǎn)速范圍8000r/min~12000r/min。
原始蜂膠：
冷凍后敲碎成小塊，用高速組織搗碎機(jī)粉碎，過(guò)14目篩。
稱(chēng)取約1g樣品，加入30mL乙醇，65℃水浴加熱45分鐘，攪拌溶解。
冷卻后過(guò)濾，用乙醇洗滌濾渣至濾液無(wú)色，稀釋至50mL待測(cè)。
精制蜂膠：
稱(chēng)取約0.5g樣品，按上述方法溶解后稀釋至50mL。
或吸取5mL~10mL溶液，稀釋至50mL待測(cè)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：
精密吸取蘆丁對(duì)照品使用溶液1mL~6mL，分別置于50mL容量瓶中。
加入乙醇至15mL，依次加入硝酸鋁溶液和醋酸鉀溶液各1mL，搖勻后加水至刻度，靜置1小時(shí)。
在415nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或計(jì)算回歸方程。
空白試驗(yàn)：精密吸取待測(cè)試料溶液1.0mL，按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方法操作，但不加顯色劑。
測(cè)定：精密吸取待測(cè)試料溶液1.0mL，按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方法操作，測(cè)定吸光度。
結(jié)果計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線或回歸方程計(jì)算試料溶液中的黃酮類(lèi)化合物含量（mg）。
結(jié)果計(jì)算：蜂膠中黃酮類(lèi)化合物的總含量按公式計(jì)算，結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后兩位。
允許差：
原始蜂膠：同一操作者兩次平行測(cè)試結(jié)果允許相對(duì)相差8%。
精制蜂膠及蜂膠溶液：允許相對(duì)相差5%。
廢止時(shí)間：根據(jù)國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局2024年9月通知，GB/T 20574-2006將于2025年3月1日廢止。
替代方案：將采用更先進(jìn)的色譜檢測(cè)技術(shù)，以提高測(cè)定的準(zhǔn)確性和可靠性。
回收率問(wèn)題：研究表明，該方法對(duì)高良姜素等部分黃酮類(lèi)化合物的回收率較高（如98.17%），但對(duì)短葉松素等大多數(shù)黃酮類(lèi)化合物的回收率較低（如4.13%~4.94%），實(shí)測(cè)結(jié)果可能無(wú)法完全反映蜂膠總黃酮的實(shí)際含量。
第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu) , 第三方檢測(cè) , 國(guó)標(biāo)檢測(cè) , 檢測(cè) , 檢測(cè)中心
第三方檢測(cè)技術(shù)服務(wù)，涂料檢測(cè)服務(wù)，環(huán)境生態(tài)監(jiān)測(cè)，計(jì)量檢測(cè)服務(wù)
一般項(xiàng)目：環(huán)境保護(hù)監(jiān)測(cè)；生態(tài)資源監(jiān)測(cè)；土地調(diào)查評(píng)估服務(wù)；工程和技術(shù)研究和試驗(yàn)發(fā)展；醫(yī)學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展；自然科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展；農(nóng)業(yè)科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展；終端計(jì)量設(shè)備銷(xiāo)售；計(jì)量技術(shù)服務(wù)；標(biāo)準(zhǔn)化服務(wù)；公路水運(yùn)工程試驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)；進(jìn)出口商品檢驗(yàn)鑒定；環(huán)保咨詢服務(wù)；環(huán)境應(yīng)急治理服務(wù)（除許可業(yè)務(wù)外，可自主依法經(jīng)營(yíng)法律法規(guī)非禁止或限制的項(xiàng)目）許可項(xiàng)目：檢驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)；特種設(shè)備
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