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原花青素的分光光度測(cè)定

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CMA CNAS
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7-10工作日左右
服務(wù)范圍
全國(guó)

原花青素的分光光度測(cè)定方法及要點(diǎn)如下:

一、測(cè)定原理

原花青素本身無(wú)色,但在熱酸處理下可生成深紅色的花青素離子。通過(guò)分光光度法測(cè)定該離子在特定波長(zhǎng)(如546nm)下的吸光度值,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算試樣中原花青素的含量。

二、適用范圍

適用于植物提取物、保健食品等樣品中原花青素的含量測(cè)定,尤其適用于總原花青素的快速篩查。

三、儀器與試劑

  1. 儀器:

  2. 紫外/可見(jiàn)分光光度計(jì)(配1cm比色杯,波長(zhǎng)范圍110~900nm)。

  3. 超聲波提取機(jī)、渦旋混合儀、天平(感量0.01mg)、具蓋安瓿瓶(10mL)、封口鉗、容量瓶(10mL、50mL、100mL)。

  4. 試劑:

  5. 甲醇、正丁醇、(純度35%~37%)、鐵銨(分析純)。

  6. 水:符合GB/T 6682規(guī)定的一級(jí)水。

  7. -正丁醇溶液:取正丁醇50mL,加5mL,用正丁醇定容至100mL。

  8. 2mol/L溶液:取20mL,加水至100mL。

  9. 鐵銨溶液:稱(chēng)取鐵銨2.0g,加2mol/L溶液溶解并定容至100mL。

  10. 原花青素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1.0mg/mL):取原花青素標(biāo)準(zhǔn)品10mg,加甲醇溶解并定容至10mL,現(xiàn)用現(xiàn)配。

  11. 原花青素標(biāo)準(zhǔn)系列工作液:用甲醇稀釋標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,配制濃度為0、10.0、25.0、50.0、100、μg/mL的系列溶液。

四、操作步驟

  1. 供試品溶液制備:

  2. 稱(chēng)取樣品10~100mg,置50mL容量瓶中,加甲醇30mL,超聲處理(功率250W,頻率50kHz)20分鐘,冷卻后加甲醇至刻度,搖勻。

  3. 離心或放置至澄清后取上清液。若原花青素含量較高,可取上清液10mL,加甲醇稀釋至100mL,搖勻。

  4. 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:

  5. 準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)系列工作液各1mL,置安瓿瓶中,加-正丁醇溶液6mL、鐵銨溶液0.2mL,混勻后封口。

  6. 沸水浴加熱40分鐘,取出后立即置冰水中冷卻至室溫。

  7. 在546nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

  8. 樣品測(cè)定:

  9. 精密吸取供試品溶液1mL,按標(biāo)準(zhǔn)曲線制作步驟操作,測(cè)定吸光度。

  10. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算試樣中原花青素的含量。

五、結(jié)果計(jì)算

試樣中原花青素的含量(X)按公式計(jì)算:

X=m×V1×1000×1000c×V×V2×1000×100

其中:

  • c:反應(yīng)混合物中原花青素的量(μg/mL);

  • V:待測(cè)樣液總體積(mL);

  • V1:樣液反應(yīng)體積(mL);

  • V2:樣液反應(yīng)后總體積(mL);

  • m:樣液所代表的試樣質(zhì)量(mg)。

  • 六、方法優(yōu)缺點(diǎn)

    1. 優(yōu)點(diǎn):

    2. 操作簡(jiǎn)便,成本較低,無(wú)需特殊儀器。

    3. 適用于快速篩查和總原花青素含量的測(cè)定。

    4. 缺點(diǎn):

    5. 準(zhǔn)確度較低,易受其他物質(zhì)干擾。

    6. 無(wú)法區(qū)分原花青素的單體、二聚體和其他寡聚體。

    七、注意事項(xiàng)

    1. 酸性試劑需現(xiàn)配現(xiàn)用,防止揮發(fā)導(dǎo)致濃度偏差。

    2. 固體樣品粒徑需過(guò)60目篩,確保提取充分性。

    3. 高溫水解步驟需嚴(yán)格控制時(shí)間,避免花青素降解。

    4. 標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)隨檢測(cè)批次更新,儀器每年需進(jìn)行波長(zhǎng)精度校準(zhǔn)。


    關(guān)鍵詞

    第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu) , 第三方檢測(cè) , 國(guó)標(biāo)檢測(cè) , 檢測(cè) , 檢測(cè)中心

    更新時(shí)間
    鉆石會(huì)員
    第2年
    統(tǒng)一社會(huì)信用代碼
    91340104MAE1J41P95
    成立日期
    2024年10月11日
    法定代表人
    解語(yǔ)心(法定代表人)
    注冊(cè)資本
    500

    主營(yíng)產(chǎn)品

    第三方檢測(cè)技術(shù)服務(wù),涂料檢測(cè)服務(wù),環(huán)境生態(tài)監(jiān)測(cè),計(jì)量檢測(cè)服務(wù)

    經(jīng)營(yíng)范圍

    一般項(xiàng)目:環(huán)境保護(hù)監(jiān)測(cè);生態(tài)資源監(jiān)測(cè);土地調(diào)查評(píng)估服務(wù);工程和技術(shù)研究和試驗(yàn)發(fā)展;醫(yī)學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;自然科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;農(nóng)業(yè)科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;終端計(jì)量設(shè)備銷(xiāo)售;計(jì)量技術(shù)服務(wù);標(biāo)準(zhǔn)化服務(wù);公路水運(yùn)工程試驗(yàn)檢測(cè)服務(wù);進(jìn)出口商品檢驗(yàn)鑒定;環(huán)保咨詢服務(wù);環(huán)境應(yīng)急治理服務(wù)(除許可業(yè)務(wù)外,可自主依法經(jīng)營(yíng)法律法規(guī)非禁止或限制的項(xiàng)目)許可項(xiàng)目:檢驗(yàn)檢測(cè)服務(wù);特種設(shè)備

    公司簡(jiǎn)介

         安徽量科檢測(cè)技術(shù)有限公司是一家一站式檢測(cè)服務(wù)中心,為企業(yè)及個(gè)人用戶提供低成本、高效率、更便捷的檢測(cè)服務(wù)。     主要提供的服務(wù)有:環(huán)境保護(hù)監(jiān)測(cè);生態(tài)資源監(jiān)測(cè);土地調(diào)查評(píng)估服務(wù);工程和技術(shù)研究和試驗(yàn)發(fā)展;醫(yī)學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;自然科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;農(nóng)業(yè)科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;終端計(jì)量設(shè)備銷(xiāo)售;計(jì)量技術(shù)服務(wù);標(biāo)準(zhǔn)化服務(wù);公路水運(yùn)工程試驗(yàn)檢測(cè)服務(wù);進(jìn)出口商品檢驗(yàn)鑒定;環(huán)保咨詢服務(wù);環(huán)境應(yīng)急治理服務(wù)許可項(xiàng)檢驗(yàn)檢測(cè)服務(wù);特種設(shè)備檢驗(yàn)檢測(cè);...

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