適用范圍：適用于各類配方食品、植物油、水果和蔬菜中維生素 K1 的測(cè)定。

原理：嬰幼兒食品和乳品、植物油等樣品經(jīng)脂肪酶和淀粉酶酶解，正己烷提取樣品中的維生素 K1 后，用 C18液相色譜柱將維生素 K1與其他雜質(zhì)分離，鋅柱柱后還原，熒光檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法定量。水果、蔬菜等低脂性植物樣品，用異丙醇和正己烷提取其中的維生素K1，經(jīng)中性氧化鋁柱凈化，去除葉綠素等干擾物質(zhì)，再用 C18 液相色譜柱分離，鋅柱柱后還原，熒光檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法定量。

試劑和材料：所用試劑均為分析純，水為 GB/T 6682 規(guī)定的一級(jí)水。

儀器設(shè)備：主要包括高效液相色譜儀（配熒光檢測(cè)器）、離心機(jī)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、氮吹儀等。

樣品處理：對(duì)于嬰幼兒食品和乳品、植物油，稱取適量樣品，加入脂肪酶和淀粉酶酶解，然后用正己烷提取，提取液經(jīng)濃縮等處理。對(duì)于水果、蔬菜，稱取樣品，加入異丙醇和正己烷提取，提取液經(jīng)中性氧化鋁柱凈化后濃縮。

色譜條件：常用 C18 反相色譜柱，流動(dòng)相可采用甲醇 - 四氫呋喃 - 冰乙酸等混合溶液，柱溫一般為 20℃左右，流速約1mL/min，激發(fā)波長 243nm，發(fā)射波長 430nm。

標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：將維生素 K1標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液按濃度由低到高注入液相色譜儀，測(cè)得相應(yīng)色譜峰面積，以標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液中維生素 K1的濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

試樣溶液測(cè)定：將處理好的試樣溶液注入液相色譜儀，測(cè)得相應(yīng)色譜峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到試樣溶液中維生素 K1的濃度。若試樣溶液中維生素 K1 濃度超出線性范圍，需適當(dāng)減少取樣量重新處理測(cè)定。

結(jié)果計(jì)算：根據(jù)公式計(jì)算試樣中維生素 K1 的含量，公式為 X=ρ×V1×V3×100/(m×V2×1000)，其中 X為試樣中維生素 K1 的含量（μg/100g），ρ 為由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的試樣溶液中維生素 K1 的濃度（ng/mL），V1為提取液總體積（mL），V3 為定容液總體積（mL），m 為試樣質(zhì)量（g），V2 為分取的提取液體積（mL）。

檢出限和定量限：嬰幼兒食品和乳品、植物油，當(dāng)取樣量為 1g，提取液分取 5mL，濃縮后定容 1mL 時(shí)，檢出限為1.5μg/100g，定量限為 5μg/100g；果蔬樣品當(dāng)取樣量為 5g，提取液分取 5mL，濃縮后定容 1mL 時(shí)，檢出限為0.3μg/100g，定量限為 1μg/100g。