大腸菌群并非細(xì)菌學(xué)分類命名，而是衛(wèi)生細(xì)菌領(lǐng)域的用語，它不代表某一個(gè)或某一屬細(xì)菌，而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關(guān)的細(xì)菌，這些細(xì)菌在生化及血清學(xué)方面并非完全一致，其定義為：需氧及兼性厭氧、在37℃能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽胚桿菌。一般認(rèn)為該菌群細(xì)菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產(chǎn)氣克雷伯氏菌和陰溝腸桿菌等。

大腸菌群分布較廣，在恒溫動(dòng)物糞便和自然界廣泛存在。調(diào)查研究表明，大腸菌群細(xì)菌多存在于恒溫動(dòng)物糞便、人類經(jīng)常活動(dòng)的場(chǎng)所以及有糞便污染的地方，人、畜糞便對(duì)外界環(huán)境的污染是大腸菌群在自然界存在的主要原因。糞便中多以典型大腸桿菌為主，而外界環(huán)境中則以大腸菌群其他型別較多。

關(guān)于大腸菌群，北京清析技術(shù)研究院可提供菌落總數(shù)、大腸菌群計(jì)數(shù)、大腸桿菌計(jì)數(shù)、大腸菌群總數(shù)、大腸桿菌、腸球菌、菌落總數(shù)、腸道致病菌、糞鏈球菌、腸道菌群平衡、埃希氏菌、腸道菌群多樣性等檢測(cè)項(xiàng)目。同時(shí)，北京清析技術(shù)研究院可對(duì)大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產(chǎn)氣克雷伯氏菌和陰溝腸桿菌、韻埃希氏菌屬、檸檬酸桿菌屬、魔雷伯氏菌屬和腸桿菌屬等進(jìn)行檢測(cè)。

檢測(cè)方法

1）檢測(cè)器材

（1）培養(yǎng)基乳糖膽鹽發(fā)酵管，乳糖發(fā)酵管，伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基（EMB）。

（2）試劑 革蘭染色液等。

（3）器材平皿，試管，發(fā)酵管，吸管，三角瓶，廣口瓶，均質(zhì)器或乳缽，培養(yǎng)箱，恒溫水浴鍋等。

2）檢測(cè)步驟

1.采樣及稀釋

（1）按無菌操作法將檢樣25g（或25mL）放于含有225mL無菌水的三角瓶中（瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠）或滅菌乳缽內(nèi)，經(jīng)充分振搖或研磨做成1：10的均勻稀釋液。固體檢樣用無菌均質(zhì)器，以8000～10000r/min的速度離心1min，做成1：10的稀釋液。

（2）用1mL滅菌吸管吸取1：10稀釋液1Ml，注入含有9mL無菌水的試管內(nèi)，振搖混勻，做成1：100的稀釋液，換用1支lmL滅菌吸管，按上述操作依次作l0倍系列稀釋液。

（3）根據(jù)食品的衛(wèi)生要求或?qū)z驗(yàn)樣品污染情況的估計(jì)，選擇三個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度接種3管。也可直接用樣品接種。

2.乳糖初發(fā)酵試驗(yàn)

即通常所說的假定試驗(yàn)。其目的在于檢查樣品中有無發(fā)酵乳糖產(chǎn)生氣體的細(xì)菌。將待檢樣品接種于乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，接種量在1mL以上者，用雙倍乳糖膽鹽發(fā)酵管；lmL及1mL以下者，用單倍乳糖膽鹽發(fā)酵管。每一個(gè)稀釋度接種3管，置36±1℃溫箱內(nèi)，培養(yǎng)24±2h，如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣，則可報(bào)告為大腸菌群陰性，如有產(chǎn)氣者，則按下列程序進(jìn)行。

3.分離培養(yǎng)

將產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別劃線接種于伊紅美藍(lán)瓊脂平板，置36±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)18～24h，然后觀察菌落形態(tài)并作革蘭氏染色、鏡檢并作復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。

4.乳糖復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)

即通常所說的證實(shí)試驗(yàn)，其目的在于證明經(jīng)乳糖初發(fā)酵試驗(yàn)呈陽性反應(yīng)的試管內(nèi)分離到的革蘭陰性無芽胞桿菌，確能發(fā)酵乳糖產(chǎn)生氣體。在上述選擇性EMB培養(yǎng)基上，挑取可疑的大腸菌群菌落1～2個(gè)進(jìn)行革蘭染色，同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管，置36±l℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)24±2小時(shí)，觀察產(chǎn)氣情況。凡乳糖發(fā)酵管產(chǎn)氣，革蘭染色為陰性反應(yīng)的無芽胞桿菌，即報(bào)告為大腸菌群陽性；凡乳糖發(fā)酵管不產(chǎn)氣或革蘭染色為陽性，則報(bào)告為大腸菌群陰性。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

1、SN/T 3924-2014出口貝類中大腸菌群、糞大腸菌群檢測(cè)方法

2、HJ 755-2015 水質(zhì) 總大腸菌群和糞大腸菌群的測(cè)定紙片快速法

3、SN/T 0169-2010進(jìn)出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌檢測(cè)方法 

4、DB23/T 3312-2022水質(zhì)總大腸菌群、糞大腸菌群和細(xì)菌總數(shù)監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范

5、AS 4276.5:2019 水微生物學(xué) 方法5：大腸菌群、大腸桿菌和耐熱大腸菌群 膜過濾法

6、DB21/T 2368-2014 海水中總大腸菌群和糞大腸菌群快速測(cè)定酶底物法

7、DB12/T 956-2020奶牛場(chǎng)糞污中總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌的測(cè)定 酶底物法

8、HJ 1001-2018 水質(zhì) 總大腸菌群的測(cè)定、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌的測(cè)定 酶底物法

以上就是關(guān)于大腸菌群檢測(cè)的介紹，北京清析技術(shù)研究院提供分析、檢測(cè)、測(cè)試、鑒定、研發(fā)等技術(shù)服務(wù)，已獲得CMA、CNAS等資質(zhì)證書。總院位于北京，在上海、廣州、深圳、合肥、南京、成都、武漢等地區(qū)設(shè)立27家分院，工程師一對(duì)一咨詢，寄樣或上門任您選擇，為您提供便利的檢測(cè)服務(wù)。