怎樣用酶去掉植物的細胞壁（三）-久久精品192.168.0.1,國產(chǎn)精品久久久久久無遮擋
分離原生質(zhì)體時，首先要讓酶制劑大量地吸附到細胞壁的纖維素上去，因此，一般先將材料分離成單細胞，然后分解細胞壁。采用將酶液減壓滲入組織，或?qū)⒔M織切成薄片等方法，都可增加酶液與纖維素分子接觸的機會。
酶處理目前常用的多是“一步法”，即把一定量的纖維素酶，果膠酶和半纖維素酶組成混合酶溶液，材料在其中處理一次即可得到分離的原生質(zhì)體。
植物材料須按比例和酶液混合才能有效地游離原生質(zhì)體，一般去表皮的葉片需酶量較少，而懸浮細胞則用酶量較大。每克材料用酶液10～30ml不等。
由于不同材料的生理特點不同，在研究游離條件時，必須試驗不同滲透壓濃度的細胞，找出適宜的滲透濃度。例如，游離小麥是浮細胞的原生質(zhì)體的酶液中須加入0．55mol/l甘露醇，游離水稻懸浮細胞的原生質(zhì)體的酶液中只加 0．4～0．45mol／l的甘露醇，兩者差別較大。
酶解處理時把滅菌的葉片或子葉等材料下表皮撕掉，將去表皮的一面朝下放入酶液中。去表皮的方法是：在無菌條件下將葉面晾干、順葉脈輕輕撕下表皮。如果去表皮很困難，也可直接將材料切成小細條，放入酶液中。
對于懸浮細胞等材料，如果細胞團的大小很不均一，在酶解前先用尼龍網(wǎng)篩過濾一次，將原細胞團去掉，留下較均勻的小細胞團時再進行酶解。
酶解處理一般地在黑暗中靜止進行，在處理過程中偶爾輕輕搖晃幾下。對于懸浮細胞，愈傷組織等難游離原生質(zhì)體的材料，可置于搖床上，低速振蕩以促進酶解。酶解時間幾小時至幾十小時不等、以原生質(zhì)體游離下來為準。但是，時間過長對原生質(zhì)體有害，所以一般不應(yīng)超過24h。酶解溫度要從原生質(zhì)體和酶的活性兩方面考慮。對于這幾種酶來說，處理溫度在40～50℃，但這個溫度對植物細胞來說太高，所以一般都在25℃ 左右進行酶解。