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1、取本品，用氯化鉀溶液（取0.2mol/L氯化鉀溶液250mL與0.2mol/L鹽酸溶液53mL，用水稀釋至1000mL）溶解并稀釋制成每1mL中約含50μg的溶液，照紫外-可見分光光度法（附錄IVA）測定，在264nm、285nm、305nm及460nm的波長處有大吸收。
2、在含量測定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。
3、本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集887圖）一致。
羥鈷胺素
避光操作，取鑒別1項(xiàng)下的溶液，照紫外-可見分光光度法（附錄IVA）測定，在460nm與352nm波長處的吸光度比值應(yīng)不低于0.90。
有關(guān)物質(zhì)
避光操作，取本品約25mg，精密稱定，置25mL量瓶中，加水適量，超聲處理使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。精密量取1mL，置100mL量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。照含量測定項(xiàng)下的色譜條件，取對照溶液10μg注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20%。精密量取供試品溶液與對照溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間3倍。供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，各雜質(zhì)峰面積之和不得大于對照溶液的主峰面積（1.0%）。
干燥失重
取本品約0.1g，置五氧化二磷干燥器內(nèi)，在60℃減壓干燥至恒重，減失重量不得過12.0%（附錄Ⅷ L）。
避光操作，照高效液相色譜法（附錄V D）測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)
用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.2）-乙腈（85:15）為流動(dòng)相，柱溫為35℃，檢測波長為260nm。理論板數(shù)按腺苷鈷胺峰計(jì)箅不低于1500。腺苷鈷胺峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。
測定法
取本品約20mg，精密稱定，置200mL量瓶中，加水適量，超聲處理使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，精密量取10μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取腺苷鈷胺對照品同法測定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得
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