照高效液相色譜法(通則0512)測定。
供試品溶液:取本品適量,加流動相溶解并稀釋制成每1mL中含茶苯海明0.4mg的溶液。
對照溶液:精密量取供試品溶液適量,用流動相定量稀釋制成每1mL中含茶苯海明6μg的溶液。
系統(tǒng)適用性溶液:取茶堿與茶苯海明適量,加流動相溶解并稀釋制成每1mL中各約含20μg的溶液。
色譜條件:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以甲醇-三乙胺緩沖液(1:1)為流動相,檢測波長為225nm,進(jìn)樣體積10μL。
系統(tǒng)適用性要求:系統(tǒng)適用性溶液色譜圖中,出峰順序依次為茶堿峰、8-氯茶堿峰與苯海拉明峰,理論板數(shù)按苯海拉明峰計算不低于2000,茶堿峰與8-氯茶堿峰之間的分離度應(yīng)符合要求。
測定法:精密量取供試品溶液與對照溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖至苯海拉明峰保留時間的2倍。
限度:供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰,茶堿峰面積不得大于對照溶液中8-氯茶堿峰面積的0.75倍,各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液中8-氯茶堿峰面積。
干燥失重
取本品,置五氧化二磷干燥器中,減壓干燥至恒重,減失重量不得過0.5%(通則0831)。
熾灼殘渣
取本品1.0g,依法檢查(通則0841),遺留殘渣不得過0.1%。
重金屬
取熾灼殘渣項下遺留的殘渣,依法檢查(通則0821第二法),含重金屬不得過百萬分之十。
苯海拉明
取本品約0.3g,精密稱定,加冰醋酸15mL,微溫使溶解,放冷,加結(jié)晶紫指示液1滴,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯藍(lán)色,并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于25.54mg的C17H21NO。
8-氯茶堿
取本品0.3g,精密稱定,置200mL量瓶中,加水50mL、氨試液3mL與10%xiaosuanan溶液6mL,置水浴上加熱5分鐘,精密加xiaosuanyin滴定液(0.1mol/L)25mL,搖勻,再置水浴上加熱15分鐘,并時時振搖,放冷,用水稀釋至刻度,搖勻,放置15分鐘,濾過,精密量取續(xù)濾液100mL,加硝酸使成酸性后,再加硝酸3mL與硫酸鐵銨指示液2mL,用硫氰酸銨滴定液(0.1mol/L)滴定。每1mlxiaosuanyin滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于21.46mg的C7H7ClN4O2。
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