紅球藻中蝦青素的測定

液相色譜法

1范圍

本標準規(guī)定了紅球藻(Haematococcus)中蝦青素的液相色譜測定方法。

本標準適用于雨生紅球藻(Haematococcus plurvialis)萊粉中蝦青索含量的測定。

2規(guī)范性引用文件

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GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

3原理

試樣經(jīng)二氯甲燒與甲醇混合溶液提取,氫氧化鈉甲醇溶液皂化,使其中的蝦青素酯轉(zhuǎn)化成游離態(tài)的蝦青素,經(jīng)Csn反相液相色譜柱分離后,用配有紫外檢測器的液相色譜儀測定,外標法定量。

4試劑

所用試劑除另有規(guī)定外均為色譜純。

4.1 試驗用水應(yīng)符合GB/T 6682中一級水的要求。

4.2丙酮。

4.3磷酸;優(yōu)級純。

4.4氫氧化鈉;優(yōu)級純。

4.5甲醇。

4.6二氯甲烷。

4.7叔丁基甲基醚。

4.82,6-二叔丁基對甲酚:化學純。

4.91%磷酸溶液(體積分數(shù)):量取10 mL磷酸(4.3)和990 mL水,混勻后備用。

4.10二氯甲烷-甲醇溶液;量取250 mL二氯甲烷和750 mL甲醇,加入 0.5 g2,6-二叔丁基對甲酚(4.8),混勻后備用。

4.11 0.1 mol/L氫氧化鈉-甲醇溶液;稱取0.4g氫氧化鈉(4.4),用甲醇溶解并稀釋至100mL,混勾后備用。

4.12 2%磷酸-甲醇溶液(體積分數(shù));量取2mL 磷酸(4.3)和98 mL甲醇,混勾后備用。

4.13全反式蝦青素.13-順蝦青素、9-順蝦青素標準品;純度≥95%。

4.14全反式蝦青素標準儲備溶液;準確稱取全反式蝦青素標準品約10 mg,用丙酮溶解并定容于500mL容量瓶中,此溶液濃度為20 ug/mL,充氮密封,置-18℃冰箱中避光保存,有效期1個月.