色氨酸檢測
色氨酸是必需氨基酸,酸水解會破壞色氨酸,所以蛋白質(zhì)樣品測總色氨酸必須用堿水解;測游離色氨酸不需要水解,直接提取上機(jī)。
GB/T 15400-2018 飼料中色氨酸的測定(HPLC熒光法,堿水解)全國標(biāo)準(zhǔn)信...
GB 5009.124 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中氨基酸的測定(食品,嬰幼兒配方食品常用堿水解HPLC)
藥典:原料藥、氨基酸注射液色氨酸含量及有關(guān)物質(zhì)(HPLC / LC-MS)
可選資質(zhì):CMA、CNAS,報告可用于招投標(biāo)、產(chǎn)品備案、質(zhì)檢。
表格
方法適用場景特點(diǎn)| HPLC - 熒光檢測器() | 食品、飼料、原料、蛋白樣品 | 色氨酸天然熒光,靈敏度高,成本適中,國標(biāo)主流 |
| UHPLC / LC-MS/MS | 血清、尿液、生物樣本、低含量基質(zhì)、代謝物(犬尿氨酸、5-HT) | 抗干擾強(qiáng),可同時測色氨酸 + 代謝通路,科研 / 臨床常用 |
| 分光光度法 | 快速篩查,老標(biāo)準(zhǔn) | 精度低,現(xiàn)在很少用于正式報告 |
樣品前處理關(guān)鍵點(diǎn):
總色氨酸(蛋白結(jié)合):堿水解(氫氧化鋰 /氫氧化鋇,110℃,20h),中和、過濾上機(jī);不能用普通 6M 酸水解,色氨酸會完全分解
游離色氨酸:蛋白沉淀(TCA),直接提取,不水解
食品:乳粉、嬰幼兒配方食品、谷物、豆制品、肉制品、蛋白粉
飼料:豆粕、玉米、配合飼料、發(fā)酵飼料、預(yù)混料
醫(yī)藥 / 保健品:氨基酸原料藥、復(fù)方氨基酸注射液、多肽、固體飲料
生物樣本:血漿、血清、尿液、組織、細(xì)胞上清(科研 / 臨床)
總色氨酸:樣品中全部(蛋白結(jié)合 + 游離)色氨酸,配方營養(yǎng)標(biāo)簽、飼料配方評估常用
游離色氨酸:僅游離態(tài),不包含蛋白里面結(jié)合的色氨酸
色氨酸及其代謝物:Trp、犬尿氨酸 Kyn、5 - 羥色胺5-HT、犬尿喹啉酸等(代謝組、臨床科研)
固體樣品 ≥50g;液體 ≥10mL
避光!色氨酸見光易降解,樣品冷藏 / 冷凍,避光密封,避免反復(fù)凍融
樣品基質(zhì)復(fù)雜(深色發(fā)酵樣品)要提前說明,基質(zhì)會影響前處理回收率
食品營養(yǎng)成分表、標(biāo)簽備案
飼料配方氨基酸平衡評估
原料藥含量、雜質(zhì)檢測(藥典)
科研:色氨酸代謝通路、炎癥、抑郁相關(guān)生物標(biāo)志物
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