食品 PCR 牛、羊、豬源性成分檢測
用于定性篩查食品中是否含有牛、羊、豬 DNA，主要用于肉類摻假鑒別、標簽符合性核查、清真 /素食產(chǎn)品核驗、原料質(zhì)控。
適用樣品：生鮮肉、凍肉、肉腸、肉糜、肉罐頭、肉松、復合調(diào)味料、明膠、乳及肉制品等；高溫滅菌、深度加工樣品依然可測（DNA片段化，但種屬特異性短片段仍可擴增）國家市場監(jiān)...
GB/T 38164-2019《常見畜禽動物源性成分檢測方法 實時熒光 PCR法》（現(xiàn)行國標，TaqMan 探針法，檢出限 1% 質(zhì)量分數(shù)，可同時測牛、綿羊 /山羊、豬等）全國標準信...
BJS202605《食品中多種動物源性成分檢測》（市場監(jiān)管總局食品補充檢驗方法，多組分同步熒光 PCR，靶標線粒體cytb 基因，檢出限 1%）國家市場監(jiān)...
GB 25165-2010《明膠中牛、羊、豬源性成分的定性檢測方法 實時熒光 PCR 法》（專門針對明膠基質(zhì)）科技導報社
傳統(tǒng)普通 PCR（凝膠電泳）也可做定性，但靈敏度低、易污染，第三方檢測機構(gòu)主流采用實時熒光PCR（qPCR）。
提取樣品總 DNA，加入牛、羊、豬種屬特異性引物 +熒光探針，只擴增對應物種的線粒體基因（cytb 等）；擴增過程產(chǎn)生熒光信號，儀器記錄 Ct 值。
陽性：出現(xiàn)擴增曲線，Ct 低于閾值 → 檢出該動物源性成分
陰性：無擴增曲線 → 未檢出
可疑區(qū)間：Ct 在臨界區(qū)間，需要復測確認國家市場監(jiān)...
樣品前處理：均質(zhì)粉碎，去除油脂、鹽分、色素等 PCR抑制劑（高溫加工樣品抑制劑風險更高）
DNA 提取：磁珠法 / 柱提法提取基因組 DNA，檢測 DNA 濃度與純度
PCR體系配制：分別配置牛、羊、豬反應體系，同時設置陽性對照、陰性對照、空白對照（質(zhì)控防假陽性/ 假陰性）
實時熒光 PCR 擴增
結(jié)果判讀與報告：定性結(jié)果：檢出 /未檢出；常規(guī)方法只定性，不能直接給出摻假百分比；如需定量摻假比例，需要 ddPCR 數(shù)字PCR。
檢出限 LOD：1%（質(zhì)量分數(shù)），即樣品中含有≥1% 的牛 / 羊 /豬成分可檢出；部分體系可做到 0.1%（海關舊標準）中華人民共...
特異性：牛、羊、豬之間無交叉擴增；但牛包含黃牛、水牛、牦牛；羊包含綿羊、山羊。
局限性：只能判斷有沒有該物種 DNA，不能區(qū)分生肉 /熟肉，不能區(qū)分肌肉、骨、皮、明膠等組織來源；強降解樣品（長時間高溫高壓）會出現(xiàn)假陰性。
CMA 報告：出具定性結(jié)果：牛源性成分：檢出 / 未檢出；羊源性成分：檢出 /未檢出；豬源性成分：檢出 / 未檢出
注意：“未檢出”≠不含，代表低于本方法檢出限（＜1%）
基質(zhì)干擾：高油脂、高鹽、香料、單寧會抑制 PCR，造成假陰性；樣品交叉污染容易造成假陽性。
樣品接收 → 前處理 + 提取 + PCR：1～3 個工作日；批量樣品可壓縮。
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