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食品檢測(cè) 獸藥殘留 孔雀石綠 GB/T20361
今天 23:20
項(xiàng)目：孔雀石綠 (MG)+ 隱色孔雀石綠 (LMG)、結(jié)晶紫 (GV)+ 隱色結(jié)晶紫(LGV)，屬于禁用獸藥殘留（漁藥），適用于水產(chǎn)品可食部分：魚、蝦、蟹、貝類等水產(chǎn)品。
標(biāo)準(zhǔn)號(hào)：GB/T 20361?2006，現(xiàn)行有效，發(fā)布 2006?06?21，實(shí)施2006?09?01全國(guó)標(biāo)準(zhǔn)信...
方法類型：HPLC?FLD 高效液相色譜?熒光檢測(cè)器，外標(biāo)法定量
法規(guī)判定：農(nóng)業(yè)農(nóng)村部 250 號(hào)公告，孔雀石綠為食品動(dòng)物禁用藥物，動(dòng)物性水產(chǎn)品不得檢出，以MG+LMG 總量計(jì)
檢出限 LOD：0.5?μg/kg；定量限LOQ：1.0?μg/kg
回收率范圍：0.4?100?μg/kg 加標(biāo)，70%?110%
對(duì)比：GB/T 19857?2005 為 LC?MS/MS 質(zhì)譜確證方法；GB/T20361?2006是液相熒光法，多用于實(shí)驗(yàn)室初篩，陽性建議質(zhì)譜確認(rèn)。
樣品中孔雀石綠、結(jié)晶紫，經(jīng)還原，全部轉(zhuǎn)化為隱色孔雀石綠、隱色結(jié)晶紫；乙腈?乙酸銨緩沖液提取，二氯甲烷萃取，固相萃取柱凈化；C18反相柱分離，熒光檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法計(jì)算總殘留量。
色譜柱：ODS?C18，250?mm×4.6?mm，5?μm
流動(dòng)相：乙腈 + 0.125?mol/L 乙酸銨緩沖液 (pH4.5) = 80+20（V/V）
流速：1.3?mL/min
熒光檢測(cè)器：激發(fā)波長(zhǎng)265?nm，發(fā)射波長(zhǎng)360?nm
進(jìn)樣量：20?μL
稱樣：5.00?g 均質(zhì)水產(chǎn)品樣品
還原：加入，將孔雀石綠還原為隱色孔雀石綠
提取：乙腈?乙酸銨緩沖液提取，二氯甲烷液?液萃取
凈化：中性氧化鋁柱 + 陽離子交換 SPE 柱串聯(lián)凈化
洗脫、氮吹濃縮，甲醇復(fù)溶，0.22?μm 濾膜過濾上機(jī)
必須還原完全：孔雀石綠在體內(nèi)大部分代謝為隱色孔雀石綠，只測(cè) MG會(huì)嚴(yán)重低估殘留；標(biāo)準(zhǔn)測(cè)的是兩者總和。
避光操作：孔雀石綠 / 隱色孔雀石綠見光易降解。
SPE 凈化關(guān)鍵：流速控制，甲酸、乙腈淋洗除雜質(zhì)，乙酸銨?甲醇洗脫目標(biāo)物。
結(jié)果表達(dá)：孔雀石綠殘留量 = 孔雀石綠 + 隱色孔雀石綠總量（以孔雀石綠計(jì)）。
判定：結(jié)果＜1.0?μg/kg 報(bào)告 “未檢出”；初篩陽性樣品，建議用 GB/T19857?2005液質(zhì)聯(lián)用做確證試驗(yàn)。
表格
項(xiàng)目GB/T20361?2006GB/T19857?2005| 儀器 | HPLC?FLD 熒光 | LC?MS/MS 串聯(lián)質(zhì)譜 |
| 檢出限 | 0.5?μg/kg | 0.1?μg/kg |
| 用途 | 篩選檢測(cè) | 仲裁 / 確證 |
| 定量方式 | 外標(biāo)法 | 同位素內(nèi)標(biāo) |
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