標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)：SN/T 1129-2015。

標(biāo)準(zhǔn)名稱(chēng)：牛病毒性腹瀉黏膜病檢疫技術(shù)規(guī)范。

發(fā)布日期：2015年9月2日。

實(shí)施日期：2016年4月1日。

技術(shù)歸口：國(guó)家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會(huì)。

批準(zhǔn)發(fā)布部門(mén)：國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局。

適用范圍：適用于進(jìn)出口動(dòng)物及其產(chǎn)品中牛病毒性腹瀉黏膜病的檢疫。

臨床診斷：

流行病學(xué)：了解牛群的飼養(yǎng)管理、疫病發(fā)生情況等。

臨床癥狀：觀察牛是否出現(xiàn)體溫升高、重度腹瀉、白細(xì)胞減少、大量流涎、口腔黏膜糜爛和潰瘍等癥狀。

病理變化：檢查消化道黏膜是否充血、出血、水腫和糜爛，特別是食道黏膜是否出現(xiàn)特征性病變。

病原學(xué)檢測(cè)：

病毒分離鑒定：采集血液、鼻腔分泌物、胎兒組織等樣本，進(jìn)行病毒分離和鑒定。

熒光抗體試驗(yàn)：利用熒光標(biāo)記的抗體檢測(cè)樣本中的病毒抗原。

免疫過(guò)氧化物酶單層細(xì)胞試驗(yàn)：通過(guò)免疫過(guò)氧化物酶技術(shù)檢測(cè)病毒抗原。

反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）：檢測(cè)樣本中的病毒核酸，具有靈敏度高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)。

血清學(xué)檢測(cè)：

微量血清中和試驗(yàn)：檢測(cè)血清中的中和抗體，用于評(píng)估牛的免疫狀態(tài)或感染情況。

抗原捕獲酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)：利用抗原-抗體反應(yīng)檢測(cè)樣本中的病毒抗原。

樣本采集：根據(jù)檢測(cè)目的和牛的狀態(tài)規(guī)范采集樣本，如無(wú)菌采血液或精液、采集鼻腔分泌物或胎兒組織等。樣本采集后應(yīng)立即置于冰袋或低溫環(huán)境中運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室。

樣本處理：血液樣本需分離血清；精液樣本需凍融后稀釋離心；組織樣本需加緩沖液研磨后離心取上清液。

檢測(cè)操作：嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)和標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行檢測(cè)，控制樣本采集與處理質(zhì)量，避免交叉污染；確保儀器設(shè)備正常運(yùn)行校準(zhǔn)準(zhǔn)確；實(shí)驗(yàn)環(huán)境溫濕度符合要求；操作人員做好個(gè)人防護(hù)與質(zhì)量控制。

結(jié)果判定：根據(jù)不同檢測(cè)方法的結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定。對(duì)于核酸檢測(cè)（如RT-PCR），通常以是否出現(xiàn)特異性擴(kuò)增曲線或電泳條帶，以及Ct值是否低于預(yù)設(shè)閾值來(lái)判定樣本為核酸陽(yáng)性或陰性；對(duì)于抗體檢測(cè)（如ELISA），結(jié)果通常以樣本吸光值與陰性對(duì)照吸光值的比值來(lái)表示，通過(guò)計(jì)算樣本的S/P值或阻斷率，并與試劑盒提供的臨界值比較，來(lái)判定為抗體陽(yáng)性、陰性或可疑。

保障進(jìn)出口動(dòng)物及其產(chǎn)品的安全：通過(guò)嚴(yán)格的檢疫技術(shù)規(guī)范，防止牛病毒性腹瀉黏膜病的傳入和傳出，保障我國(guó)畜牧業(yè)健康發(fā)展。

促進(jìn)國(guó)際貿(mào)易：符合國(guó)際貿(mào)易規(guī)則和標(biāo)準(zhǔn)，有利于我國(guó)動(dòng)物及其產(chǎn)品的出口，提高國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力。

提高疫病防控水平：通過(guò)規(guī)范的檢測(cè)流程和方法，提高疫病診斷的準(zhǔn)確性和及時(shí)性，為疫病防控提供科學(xué)依據(jù)。