熒光定量pcr(real-time pcr)技術(shù)

通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性的探針，對(duì)pcr產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實(shí)時(shí)在線監(jiān)控反應(yīng)過程，結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析，計(jì)算待測(cè)樣品模板的初始濃。具有應(yīng)用范圍廣、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、特異性和可靠性更強(qiáng)、自動(dòng)化程度高、無污染性、具實(shí)時(shí)性和準(zhǔn)確性等特點(diǎn)。

實(shí)驗(yàn)步驟

1. 根據(jù)基因序列設(shè)計(jì)特異性的引物和熒光探針；

2.從細(xì)胞或組織中提取總rna，檢測(cè)rna樣本od值， od260/od280比值在1.8到2.0之間

3.將提取的總rna反轉(zhuǎn)錄成cdna

4.將cdna進(jìn)行real time rt-pcr反應(yīng)，并進(jìn)行定量分析。對(duì)管家基因與內(nèi)參基因進(jìn)行同等操作，用所得到的值進(jìn)行校正，Zui后求得目的基因的相對(duì)表達(dá)量

交貨內(nèi)容

完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器及試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)

服務(wù)說明

1. 請(qǐng)?zhí)峁┍M量多的實(shí)驗(yàn)材料：細(xì)胞數(shù)應(yīng)為106以上，組織應(yīng)為100 mg以上；

2.客戶在實(shí)驗(yàn)開始前提供目的基因的相關(guān)信息（基因名稱、序列等信息），并驗(yàn)證組織或細(xì)胞中存在該基因表達(dá)；

3. pcr所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成。如果由您自己提供，必須是page純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

服務(wù)承諾：

1. 檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、客觀、可信，但不能確保一定要得到某特定結(jié)果。

2. 在規(guī)定時(shí)間內(nèi)以Zui快速將實(shí)驗(yàn)完成