免疫組化實(shí)驗(yàn)原理

依據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理，組織切片或細(xì)胞爬片標(biāo)本中的抗原先和一抗結(jié)合，再利用一抗與標(biāo)記生物素、熒光素等的二抗進(jìn)行反應(yīng)，前者再用標(biāo)記辣根過(guò)氧化物酶（hrp）或堿性磷酸酶（akp）等的抗生物素（如鏈霉親和素等）結(jié)合，Zui后通過(guò)呈色反應(yīng)或熒光來(lái)顯示細(xì)胞或組織中化學(xué)成分，在光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物，從而能夠在細(xì)胞爬片或組織切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量。

免疫組化主要步驟

（一）切片制備

1.  洗載玻片：
2. 包埋組織：

 3.  切片：

 4. 撈組織：

（二）免疫組化染色流程
sp法

1）脫蠟、水化；

2）pbs洗3次/5分鐘；

3）滴加3%h2o2（80%甲醇），室溫靜置10分鐘；

4）pbs洗3次/5分鐘；

5）抗原修復(fù)；

6）pbs洗3次/5分鐘；

7）滴加正常山羊血清封閉液，室溫20分鐘。甩去多余液體。

8）滴加ⅰ抗50μl，室溫靜置1小時(shí)或者4℃過(guò)夜或者37℃1小時(shí)。

9）4℃過(guò)夜后需在37℃復(fù)溫45分鐘。

10）pbs洗3次各5分鐘；

11）滴加ⅱ抗40～50μl，室溫靜置，或37℃1小時(shí)；

12）pbs洗3次/5分鐘；

13）dab顯色5分鐘;

14）pbs3次/5分鐘；

15）蘇木精復(fù)染2分鐘，鹽酸酒精分化；

16）自來(lái)水沖洗

17）脫水、透明、封片、鏡檢。

服務(wù)流程

1. 根據(jù)客戶(hù)送的樣本（固定好或者包埋好），以及樣本類(lèi)型（是否需要脫鈣等），安排實(shí)驗(yàn)

2.包埋或者切片后，根據(jù)客戶(hù)所測(cè)指標(biāo)，選取合適的一抗.二抗進(jìn)行制片

3.（可選）根據(jù)上述所做好的切片進(jìn)行拍片

4.（可選）針對(duì)做好的玻片進(jìn)行分析，分析時(shí)選取較好的區(qū)域，分析三個(gè)視野

5.提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告：包括詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法及免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)圖表 

服務(wù)說(shuō)明

a. 請(qǐng)?zhí)峁┍M量多的實(shí)驗(yàn)材料

b.客戶(hù)須在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前確保其細(xì)胞或組織中有目的蛋白的表達(dá)，并提供目的蛋白的相關(guān)信息（蛋白名稱(chēng)、大小等信息）

c.客戶(hù)應(yīng)對(duì)所提供的材料及信息負(fù)責(zé)，如因客戶(hù)提供的材料及信息不準(zhǔn)確而引起的實(shí)驗(yàn)延誤或經(jīng)濟(jì)損失由客戶(hù)承擔(dān)

d.實(shí)驗(yàn)所需的一抗，可以由您自己提供，也可以委托本公司購(gòu)買(mǎi)或提供。如果由您自己提供，必須確保一抗的質(zhì)量，本公司不接受保存超過(guò)1年的一抗。

服務(wù)承諾：

一.在Zui短的時(shí)間內(nèi)快速將實(shí)驗(yàn)完成

二.保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、客觀(guān)、可信，但不能確保一定要得到某特定結(jié)果