廣州紫薯花青素檢測(cè) 黑枸杞花青素檢測(cè)-免費(fèi)看三級(jí)錄像-國產(chǎn)熟婦精品倫一區(qū)二區(qū)三區(qū)  

花青素作為一種天然食用色素，安全、無毒、資源豐富，而且具有一定營(yíng)養(yǎng)和藥理作用，在食品、化妝品、醫(yī)藥等方面有著巨大的應(yīng)用潛力。

自然界有超過300種不同的花青素。他們來源于不同種水果和蔬菜如紫甘薯、越橘、酸果蔓、黑枸杞、藍(lán)莓、葡萄、接骨木紅、黑加侖、紫胡蘿卜和紅甘藍(lán)、顏色從紅到藍(lán)。這些花青素主要包含飛燕草素（Delchindin）、矢車菊素（Cyanidin）、牽牛花色素（Petunidin）、芍藥花色素（Peonidin）。

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了植物源性食品中的飛燕草色素、矢車菊色素、矮牽牛色素、天竺葵色素、芍藥素和錦葵色素共6種花青素的高效液相色譜測(cè)定方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于植物源性食品中花青素含量的測(cè)定。

本標(biāo)準(zhǔn)的檢出限:以稱樣量為1 g，定容體積為50mL計(jì)，飛燕草色素、矢車菊色素、天竺奏色素、芍 藥素和錦葵色素5種花青素的檢出限均為0. 15 mg/kg;矮牽牛色素的檢出限為0.5 mg/kg。同樣條件 下定量限:飛燕草色素、矢車菊色素、天竺葵色素、芍藥素和錦葵色素5種花青素均為0. 5 mg/kg;矮牽牛色素為1.5 mg/kg。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其Zui新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

GB/T 6379.1測(cè)量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度(正確度與精密度)第1部分:總則與定義 GB/T 6379.2測(cè)量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度(正確度與精密度)第2部分:確定標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量方法重復(fù) 性與再現(xiàn)性的基本方法

GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

3原理

植物源性食品中的花青素主要以花色苷的形式存在。試樣經(jīng)乙醇一水的強(qiáng)酸溶液超聲提取花色苷后，經(jīng)沸水浴將花色苷水解成花青素，用高效液相色譜法測(cè)定，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。

4試劑和材料

除非另有規(guī)定，僅使用分析純?cè)噭?。水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。

4.1無水乙醇(C2H5OH):色譜純。

4.2甲酸(CH2Oz):色譜純。

4.3甲醇(CH3OH):色譜純。

4.4鹽酸(HCl):優(yōu)級(jí)純。

4.5提取液:無水乙醇+水+鹽酸=2+l +l(V+V+V)，取200 mL無水乙醇、lOOmL水和lOOmL 鹽酸混勻。

4.6 10%鹽酸甲醇溶液(體積比)：取10 mL鹽酸、90mL甲醇混勻。

4.7 飛燕草色素(Delphinidin) : CAS 號(hào)528 - 53 - 0，純度≥96 %。

4. 8 矢車菊色素(Cyanidin) : CAS 號(hào)528 - 58 - 5，純度≥98 %。

4.9 矮牽牛色素(Petunidin chloride):CAS 號(hào) 1429 - 30 - 7,純度≥96%。

4.10天竺葵色素(Petunidin):CAS號(hào)134-04-3，純度≥96%。

4. 11 芍藥素(Peonidin) :CAS號(hào)134-01-0,純度≥98%。

4. 12 錦葵色素(Malvidin) :CAS 號(hào)643 - 84 - 5,純度≥96%。

4.13單標(biāo)儲(chǔ)備溶液

分別準(zhǔn)確稱取飛燕草色素(Delphimdin)、矢車菊色素(Cyanidin)、矮牽牛色素(Petunidinchloride)、天竺葵色素(Pelargomdin)、芍藥素(Peonidm)和錦葵色素(Malvidin)共6種花青素標(biāo)準(zhǔn)品5. 0 mg，用10%鹽酸甲醇溶液(4. 6)溶解并分別定容至10 mL容量瓶中，即為500 mg/ L的單標(biāo)儲(chǔ)備液，于 -18°C下，貯存于密閉的棕色玻璃瓶中，保存有效期為6個(gè)月。

4.14 混合標(biāo)準(zhǔn)使用液

在使用中將單一標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液進(jìn)行混合后，用10%鹽酸甲醇溶液(4.6)作為溶劑，并逐級(jí)稀釋成 0.5mg/L、l. 0 mg/L、5. 0 mg/L、25. 0 mg/L、50. 0mg/L或其他濃度的花青素混合標(biāo)準(zhǔn)使用液。在4℃條 件下，有效期為6個(gè)月。

4.15 濾膜:0.45μm，水相濾膜。

5儀器與設(shè)備

5.1高效液相色譜儀帶

紫外或二極管陣列檢測(cè)器。

5.2 天平:精度0.01mg，0.01g。

5.3 水浴鍋:精度±2℃。

5.4 勻漿機(jī)。

5.5 超聲波清洗機(jī)。

5.6 粉碎機(jī)。

6分析步驟

6.1 試樣制備

采用四分法分取樣品，含水率高的樣品，如葡萄、茄子等，取約200g于勻漿機(jī)中勻漿;含水率低的樣品，如黑米、黑豆等，用粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，過250 的篩。所有樣品在-18°C條件下保存。

6.2提取

根據(jù)樣品中花青素含量，稱取樣品1.00g10.00g于50mL具塞比色管中，加人提取液(4. 5)定容至刻度，搖勻1 min后，超聲提取30 min。

6.3水解

超聲提取后，于沸水浴中水解1 h，取出冷卻后，用提取液a5)再次定容。靜置，取上清液，用0. 45 水相濾膜過濾，待測(cè)。樣品制備好后，在4°C條件下，保存時(shí)間不超過3d。

6.4測(cè)定

6.4.1 色譜參考條件

a) 色譜柱:C18柱,250 mm × 4. 6 mm ×5 μm或性能相當(dāng)者;

b) 流動(dòng)相A為含1%甲酸水溶液，流動(dòng)相B為含1%甲酸乙腈溶液;

c) 檢測(cè)波長(zhǎng):530 nm;

d) 柱溫:35°C;

e) 進(jìn)樣量:20 μL;

f) 梯度洗脫條件，見表1。

時(shí)間，min流速，mL/min流動(dòng)相A，％流動(dòng)相B，％

0. 00.892. 08. 0

2. 00. 888. 012. 0

5. 00.88218

10. 00.880. 020. 0

120.875. 025. 0

150.87030

180.85545

20. 00.82080

220.892. 08. 0

300.8928. 0