左旋肉堿又稱L-肉毒堿、維生素BT,化學式是C7H15NO3,化學名稱為(R)-3-羧基-2-羥基-N,N,N-三甲基丙銨氫氧化物內鹽,代表藥物有左卡尼汀。是一種促使脂肪轉化為能量的類氨基酸,純品為白色晶狀體或白色透明細粉,極易溶于水、乙醇、甲醇,微溶于丙酮,不溶于苯、三氯甲烷、乙酸乙酯。左旋肉堿極易吸潮,具有較好的溶水性和吸水性,能耐200℃以上的高溫。紅色肉類是左旋肉堿的主要來源,人體自身也可合成來滿足生理需要。不是真正意義上的維生素,只是一種類似維生素的物質。
關于左旋肉堿,北京清析技術研究院可提供左旋肉堿含量、水分、灰分、總氮、還原糖、吸濕性、微生物指標、熒光亮度、重金屬含量、總酸、蛋白質含量、酯化度、油分、氨基酸含量、總磷含量、總銅含量、維生素含量、嗅覺、口感、外觀等檢測項目。同時,北京清析技術研究院可對普通左旋肉堿、微生物發(fā)酵左旋肉堿、酯化左旋肉堿、鹽基左旋肉堿、液態(tài)左旋肉堿、固態(tài)左旋肉堿、普通食品級左旋肉堿、醫(yī)藥級左旋肉堿、化妝品級左旋肉堿、工業(yè)級左旋肉堿、天然左旋肉堿、合成左旋肉堿、有機左旋肉堿、無機左旋肉堿、脂肪酸左旋肉堿、肌肉型左旋肉堿、心臟型左旋肉堿、神經(jīng)型左旋肉堿、肝臟型左旋肉堿等進行檢測。
左旋肉堿檢測方法
高效液相色譜的方法提要:試樣中的左旋肉堿經(jīng)稀鹽酸提取,皂化后使結合態(tài)的左旋肉堿游離出來。陽離子交換固相萃取柱凈化,在氯甲酸丁酯、三乙胺的催化下與L-丙酰胺-β-萘胺發(fā)生取代反應,生成紫外吸收較強的化合物,供配有二極管陣列檢測器或紫外檢測器的高效液相色譜儀測定,外標法定量。
1、樣品處理
提?。喝榉邸⒁后w飲料類(左旋肉堿含量小于等于1000mg/kg樣品):稱取5 g(準確到0.01 g)于50mL容量瓶中,加入20 mL 0.1 mol/L鹽酸溶液,渦旋振蕩1 min,超聲5 min溶解樣品,加入5 mL1mol/L氫氧化鉀溶液渦旋混合,60℃水浴皂化30 min,冷卻至室溫,加入5 mL 1 mol/L鹽酸溶液,渦旋混勻1min,以0.1 mol/L鹽酸溶液定容至50 mL.取1 mL提取液于15 mL試管中,加入9 mL乙腈,渦旋混勻1min后取部分于5 mL離心管中,16000 r/min離心5 min,所得上清液待凈化。左旋肉堿含量大于1000mg/kg的樣品先稀釋后再提取。固體飲料類用水溶解并稀釋至合適含量后提取。
凈化:取1mL待凈化溶液于活化好的陽離子固相萃取柱中,以1滴/秒的速度過柱,用3 mL 10mmol/L的鹽酸水溶液淋洗,棄去淋洗液,真空抽干1 min,用2 mL 4%氨水甲醇溶液洗脫,收集洗脫液于15mL離心管中,40℃下氮氣吹干,所得殘渣待衍生。
衍生:在殘渣中加入0.5 mL衍生試劑(0.45 g/100 mLL-丙酰胺-β-萘胺的乙腈溶液),超聲1 min溶解殘渣并混勻,再依次加入0.5 mL催化劑Ⅰ(0.50 g/100mL三乙胺的三氯甲烷溶液)和0.5 mL催化劑Ⅱ(0.50 g/100 mL氯甲酸丁酯的三氯甲烷溶液),漩渦混勻3min,室溫下靜置反應30 min后,加入1 mL 50 mmol/L碳酸氫鈉水溶液,漩渦混勻3 min終止反應。4000r/min離心5 min,取上層水相過0.22 μm濾膜,供液相色譜測定,測定需在12 h內完成。
測定步驟:分別吸取25 μL、50 μL、100 μL、500μL、1000 μL左旋肉堿標準工作液(10.0 μg/mL)于離心管中進行衍生。所得左旋肉堿衍生產(chǎn)物標準系列濃度為0.25μg/mL、0.50 μg/mL、1 μg/mL、5 μg/mL、10μg/mL,在上述色譜條件下測定標準工作溶液和樣液,外標法定量。左旋肉堿衍生產(chǎn)物參考保留時間為3.8min??瞻自囼灣患釉嚇油猓瓷鲜霾僮鞑襟E進行。
2、計算:試樣中左旋肉堿的含量利用數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)或按照下式計算(計算結果需將空白值扣除):
式中:X=(C*n*V*1000)/(m*1000)
X——試樣中待測物的濃度,單位為毫克每千克(mg/kg);
c——試樣終溶液中待測物的濃度,單位為微克每毫升(μg/mL);
n——稀釋倍數(shù);
V——樣液Zui終定容體積,單位為毫升(mL);
m——試樣終溶液代表的試樣量,單位為克(g)。
左旋肉堿檢測標準
1、T/ZZB 0683-2018 左旋肉堿富馬酸鹽
2、T/ZZB 0682-2018 乙酰左旋肉堿鹽酸鹽
3、NY/T 1028-2006 飼料添加劑 左旋肉堿
4、T/CASME 721-2023 左旋肉堿富馬酸鹽
5、T/CASME 720-2023 乙酰左旋肉堿鹽酸鹽
6、T/ZZB 0684-2018食品營養(yǎng)強化劑 左旋肉堿(L-肉堿)
7、GB 29989-2013 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定
8、GB 食品安全國家標準 食品營養(yǎng)強化劑左旋肉堿(L-肉堿)
9、T/SATA 040-2023 食品中膽堿和左旋肉堿的測定液相色譜-串聯(lián)質譜法
10、SN/T 5146-2019 出口食品中左旋肉堿的測定高效液相色譜和液相色譜-質譜/質譜法
以上就是關于左旋肉堿檢測的介紹,北京清析技術研究院提供分析、檢測、測試、鑒定、研發(fā)等技術服務,已獲得CMA、CNAS等資質證書。總院位于北京,在上海、廣州、深圳、合肥、南京、成都、武漢等地區(qū)設立27家分院,工程師一對一咨詢,寄樣或上門任您選擇,為您提供便利的檢測服務。
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