（2）省去了繁雜的試劑配制、分裝、消毒以及大量的收尾工作，及大地提高了實(shí)驗(yàn)室的工作效率，符合現(xiàn)代檢驗(yàn)向快速、準(zhǔn)確方向發(fā)展的要求；
大腸菌群測(cè)試盒（單料型）使用說明
（gb/t4789.3-2008第一法大腸菌群mpn計(jì)數(shù)）
準(zhǔn)備測(cè)試盒
●.排氣泡：將測(cè)試盒前后分別以大約45度角傾斜，必要時(shí)可輕輕用力在桌面上敲擊數(shù)下，以排除產(chǎn)氣窗內(nèi)氣泡；并將樣品編號(hào)填寫在盒蓋上；
●開口：將測(cè)試盒平放在桌面上，左手揭開活動(dòng)盒蓋，右手持經(jīng)火焰消毒并冷卻了的專用開口器,在測(cè)試盒每管中間位置連續(xù)穿刺開口；
樣品的稀釋
1.固體或半固體樣品：稱取25g樣品，放入盛有225ml磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000r/min～10000r/min均質(zhì)1min～2min，或放入盛有225ml磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1min～2min，制成1：10的樣品勻液。
2.液態(tài)樣品：用無菌吸管吸取25ml樣品，置盛有225ml磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶（瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠）中，充分混勻，制成1：10的樣品勻液。
3.樣品勻液的ph值應(yīng)在6.5～7.5之間，必要時(shí)分別用1mol/l氫氧化鈉（naoh）或1mol/l鹽酸（hcl）調(diào)節(jié)。
4.用1ml無菌吸管或微量移液器吸取1：10樣品勻液1ml，沿管壁緩緩注入9ml磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌試管中（注意吸管或吸頭不要觸及稀釋液面），振搖試管或換用1支1ml無菌吸管反復(fù)吹打，使其混合均勻，制成1：100的稀釋液。
5.根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì)，按上述操作，依次制作10倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋1次，換用1支1ml無菌吸管或吸頭。從制備樣品勻液至樣品接種完畢，全過程不得超過15min.
初發(fā)酵試驗(yàn)
固體樣品
1：10的勻液1ml三管、1：100的勻液1ml三管、1：1000的勻液1ml三管、采用單料型大腸菌群測(cè)試盒；；操作方法如下：
前排三大管內(nèi)接種1：10的樣品勻液各1ml，后排共六管，其中三管接種1：100的樣品勻液各1ml，另外三管接種1：1000的樣品勻液各1ml，將接種好的測(cè)試盒放入托盤內(nèi)，置36±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)48±2h后，產(chǎn)氣窗內(nèi)無氣泡者，為大腸菌群陰性，如產(chǎn)氣窗內(nèi)有氣泡者，則進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。
據(jù)陽性管數(shù)查得大腸菌群Zui可能數(shù)（mpn）檢索表的實(shí)際數(shù)值報(bào)告結(jié)果
液體樣品（一般情況下有如下兩種接種方式）：
a、原液1ml三管、1：10的樣品勻液1ml三管、1：100的樣品勻液1ml三管；操作方法如下：
前排三大管內(nèi)接種原液各1ml，后排共六管，其中三管接種1：10樣品勻液各1ml，另外三管接種1：100的樣品勻液各1ml，將接種好的測(cè)試盒放入托盤內(nèi)，置36±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)48±2h后，產(chǎn)氣窗內(nèi)無氣泡者，為大腸菌群陰性，如產(chǎn)氣窗內(nèi)有氣泡者，則進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。
據(jù)陽性管數(shù)查得大腸菌群Zui可能數(shù)（mpn）檢索表的實(shí)際數(shù)值除以10報(bào)告結(jié)果；
b、1：10的樣品勻液1ml三管、1：100的樣品勻液1ml三管、1：1000的樣品勻液1ml三管；操作方法如下：
前排三大管內(nèi)接種1：10的樣品勻液各1ml，后排共六管，其中三管接種1：100樣品勻液各1ml，另外三管接種1：1000的樣品勻液各1ml；將接種好的測(cè)試盒放入托盤內(nèi)，置36±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)48±2h后，產(chǎn)氣窗內(nèi)無氣泡者，為大腸菌群陰性，如產(chǎn)氣窗內(nèi)有氣泡者，則進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。
據(jù)陽性管數(shù)查得大腸菌群Zui可能數(shù)（mpn）檢索表的實(shí)際數(shù)值報(bào)告結(jié)果.
復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)
用接種針從所有48±2h內(nèi)發(fā)酵產(chǎn)氣的lst肉湯管中分別取培養(yǎng)物兩針移種于煌綠乳糖膽鹽（bglb）肉湯管中，置36±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)24±2h后，觀察產(chǎn)氣情況，產(chǎn)氣者計(jì)為大腸菌群陽性管；沒產(chǎn)氣者，繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng)24±2h，產(chǎn)氣者計(jì)為大腸菌群陽性管；沒產(chǎn)氣者為陰性管；
注意事項(xiàng)：
●在培養(yǎng)箱內(nèi)拿出裝有測(cè)試盒的托盤以及觀察結(jié)果時(shí)，應(yīng)平拿平放，以免由于測(cè)試盒的傾向而將陽性管產(chǎn)氣窗內(nèi)氣泡排出，而影響結(jié)果.
（附注：因食品衛(wèi)生評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)沒變動(dòng)，為使檢測(cè)結(jié)果在進(jìn)行評(píng)價(jià)時(shí)能轉(zhuǎn)化為與之相對(duì)應(yīng)的數(shù)值，固體樣品只能采用雙料型測(cè)試盒；液體樣品可以采用雙料型測(cè)試盒；也可以采用單料型測(cè)試盒；此僅供參考，各單位根據(jù)具體情況，靈活掌握）