HPLC?SEC（尺寸排阻高效液相色譜）可以檢測(cè)-日本高清在線一區(qū)メイリン モデルコレクション メ,一女多男在瘋狂的倫交
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HPLC?SEC = 尺寸排阻色譜（Size Exclusion Chromatography），屬于 HPLC其中一種分離模式，藥典叫分子排阻色譜法（0514）。
依靠分子流體力學(xué)體積大小篩分，不是吸附：
大分子：進(jìn)不去填料微孔，先洗脫
小分子：鉆進(jìn)微孔，路徑變長(zhǎng)，后洗脫
水相體系（蛋白、多糖、抗體）叫凝膠過濾GFC；有機(jī)相（塑料、樹脂高分子）叫凝膠滲透 GPC，都屬于 SEC。
蛋白 / 抗體藥：?jiǎn)误w、二聚體、高分子聚集體 HMW、低分子碎片 LMW 含量（生物制藥CQA，USP / 中國(guó)藥典常用），檢測(cè)器常用 UV280nm
多糖、PEG、水溶性高分子：分子量分布、相對(duì)分子量（可搭配 MALS多角度光散射測(cè)分子量）
高分子材料（有機(jī)相 GPC）：重均分子量 Mw、數(shù)均 Mn、分子量分布 PDI，檢測(cè)器常用RI 示差折光
SEC?UV：蛋白、多肽（常用）
SEC?RI：多糖、合成高分子
SEC?MALS：直接測(cè)分子量，不需要標(biāo)品校準(zhǔn)
SEC?DAD / SEC?MS：輔助定性
樣品類型：蛋白 / 多糖 / 樹脂？水相還是有機(jī)溶解？
目標(biāo)：聚集體含量，還是分子量分布？
分子量預(yù)估范圍...
今天 00:25
尺寸排阻色譜 HPLC-SEC 檢測(cè)
今天 00:25
HPLC-SEC屬于高效液相色譜的一種分離模式，按分子流體力學(xué)體積篩分，不依靠吸附，大分子先出峰、小分子后出峰
單抗 / 蛋白 / 多肽：?jiǎn)误w、二聚體、高分子聚集體 HMW、低分子碎片LMW（生物藥放行、穩(wěn)定性考察，UV280nm 為主）
多糖、PEG、透明質(zhì)酸、水溶性高分子：分子量分布、相對(duì)分子量；搭配 MALS測(cè)分子量，不需要標(biāo)品校正
抗生素聚合物（如阿莫西林聚合物）、蛋白多肽類藥物純度檢查
塑料、樹脂、橡膠、聚酯等高分子：Mn 數(shù)均分子量、Mw 重均分子量、PDI多分散系數(shù)，檢測(cè)器常用 RI 示差折光
SEC-UV：蛋白、多肽（常用，280nm）
SEC-RI：多糖、合成高分子（無紫外吸收）
SEC-MALS：分子量，不依賴標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)（藥審 / 高端材料常用）
SEC-DAD：輔助定性，看紫外光譜
樣品必須完全溶解在選定流動(dòng)相中，不溶物會(huì)堵色譜柱
固體樣品：≥5~10 mg；液體樣品≥1~2 mL，建議配成 2~5 mg/mL
樣品溶液測(cè)試前需要 0.22/0.45 μm 濾膜過濾
告知：樣品基質(zhì)、目標(biāo)指標(biāo)（聚集體含量 / 分子量分布）、流動(dòng)相體系（水相 / 有機(jī)相）
SEC 測(cè)出來是流體力學(xué)體積對(duì)應(yīng)的表觀分子量，不是質(zhì)譜的分子量；樣品與填料發(fā)生吸附、離子相互作用會(huì)造成峰形異常、結(jié)果不準(zhǔn)，需要優(yōu)化流動(dòng)相（加鹽、調(diào) pH）。
普通科研檢測(cè)
CMA 報(bào)告（藥典 0514，藥品申報(bào) / 驗(yàn)收可用）
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