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抗體效價 (滴度)、抗體親和力檢測

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抗體效價 (滴度)、抗體親和力檢測完整說明

一、基礎(chǔ)概念區(qū)分

1. 抗體效價 / 抗體滴度(Titer)

含義:代表樣本里抗體濃度、含量高低,是抗體能夠產(chǎn)生反應(yīng)的大稀釋倍數(shù)。

例:血清稀釋 1?64 倍依舊可以發(fā)生陽性反應(yīng),滴度記作 1:64;數(shù)值越大 = 抗體總量越高。

核心用途

  1. 疫苗接種后,判斷有沒有產(chǎn)生足量保護(hù)性抗體(乙肝、狂犬、破傷風(fēng)、新冠、風(fēng)疹等)

  2. 自身抗體篩查:抗核抗體、支原體、衣原體、梅毒、溶血素 O 等

  3. 動物免疫血清、單抗上清、多抗血清的含量標(biāo)定

2. 抗體親和力(Affinity)

含義:單分子層面,抗體和抗原之間結(jié)合牢固程度;代表抗體結(jié)合抗原的松緊,和抗體含量無關(guān)。

  • 高親和力:少量抗體即可牢牢鎖住抗原,解離慢、中和能力強(qiáng)

  • 低親和力:容易和抗原脫離,即便滴度很高,實際保護(hù)效果依舊很差

  • 簡單總結(jié):滴度=抗體有多少;親和力=抗體好不好用


    二、常用檢測方法

    ? 抗體效價(滴度)檢測方法

    1. 倍比稀釋?ELISA(通用)血清做 2 倍梯度稀釋(1:2、1:4、1:8、1:16…),ELISA讀數(shù),臨界陽性的高稀釋比即為滴度

    2. 血凝 / 血凝抑制試驗(HI,流感、狂犬)

    3. 膠體金、免疫比濁法

    4. 流式細(xì)胞術(shù)

    5. 試管凝集試驗(傷寒、肥達(dá)試驗)

    ? 抗體親和力檢測主流方案

    1. 硫氰酸鹽洗脫法(ELISA?硫氰酸鈉,臨床常用)用不同濃度硫氰酸鈉破壞抗原?抗體結(jié)合,計算親和力指數(shù) AI

  • AI>50%:高親和力

  • 30%?50%:中等親和力

  • <30%:低親和力

    1. 表面等離子體共振 SPR(金標(biāo)準(zhǔn),可以測出 KD 解離常數(shù))KD 數(shù)值越小,親和力越強(qiáng)

    2. 競爭?ELISA

    3. 等溫滴定量熱 ITC


    三、兩項指標(biāo)臨床 / 科研解讀

    1. 滴度高、親和力高:優(yōu),抗體數(shù)量充足、結(jié)合牢固,保護(hù)性

    2. 滴度很高、親和力很低:體內(nèi)抗體很多,但結(jié)合松散,保護(hù)效果差,常見于早期初次免疫

    3. 滴度偏低、高親和力:抗體總量不多,但單體質(zhì)量,依舊具備中和能力

    4. 二次免疫之后,機(jī)體主要提升抗體親和力,滴度為輔

    四、常見送檢樣本

    血清、血漿、細(xì)胞上清液、單抗純化液、腹水、乳汁、腦脊液

    五、可檢測項目舉例

  • 疫苗保護(hù)性抗體:乙肝表面抗體、破傷風(fēng)、狂犬、水痘?帶狀皰疹、麻疹

  • 病原抗體:支原體、弓形蟲、巨細(xì)胞病毒、風(fēng)疹病毒

  • 單克隆抗體制備:雜交瘤上清篩選、抗體質(zhì)量鑒定

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    關(guān)鍵詞

    抗體效價測試 , 抗體親和力檢測

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