益生菌與宿主腸道的交互機(jī)制一直是腸道微生態(tài)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)，而乳酸菌分泌的細(xì)菌胞外囊泡（Bacterial ExtracellularVesicles，BEVs），是益生菌實(shí)現(xiàn)跨細(xì)胞信號(hào)傳遞的重要載體。乳酸菌胞外囊泡屬于納米級(jí)膜狀囊泡結(jié)構(gòu)，由乳酸菌細(xì)胞膜向外出芽脫落形成，囊泡內(nèi)部包裹多種功能性物質(zhì)，包括細(xì)菌膜蛋白、胞質(zhì)蛋白、脂質(zhì)、代謝小分子、DNA以及 RNA等生物活性組分。這些囊泡可以不依賴菌體直接作用于腸道上皮細(xì)胞、固有免疫細(xì)胞，參與腸道屏障修復(fù)、免疫調(diào)節(jié)、炎癥抑制、菌群信號(hào)交流等生理過程，在益生菌作用機(jī)理解析、炎癥性腸病機(jī)制研究、益生功能評價(jià)、新型微生態(tài)制劑開發(fā)等方向擁有極高的科研價(jià)值。

傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室獲取乳酸菌胞外囊泡，需要完成菌株活化、大規(guī)模厭氧培養(yǎng)、上清收集、多步驟超速離心、純化除雜整套流程。乳酸菌對培養(yǎng)環(huán)境、厭氧條件要求嚴(yán)苛，培養(yǎng)周期長；同時(shí)自制樣本極易混入菌體碎片、游離蛋白、代謝雜質(zhì)，不僅囊泡得率偏低，不同批次之間顆粒濃度、活性差異顯著，還容易引入外源污染，極大消耗科研人力與時(shí)間，也會(huì)直接影響后續(xù)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、表征檢測的數(shù)據(jù)穩(wěn)定性。

HansaBioMed 推出的LyophilizedBacterial EVs Derived from Lactobacillus乳酸菌來源凍干細(xì)菌胞外囊泡，為科研工作者提供經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)化工藝生產(chǎn)的商品化益生菌胞外囊泡標(biāo)準(zhǔn)品。產(chǎn)品選用模式乳酸菌菌株，在嚴(yán)格可控的厭氧培養(yǎng)體系下擴(kuò)增培養(yǎng)，收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液；先通過TFF 切向流過濾技術(shù)完成囊泡初步富集，去除大顆粒菌體殘?jiān)?；再采?SEC尺寸排阻色譜技術(shù)做精細(xì)純化，高效分離游離蛋白、脂類團(tuán)聚物與代謝雜質(zhì)，很大程度保留囊泡完整雙層膜結(jié)構(gòu)，保全囊泡內(nèi)部各類活性生物分子；之后采用低溫溫和凍干工藝處理得到凍干粉末，規(guī)避普通液態(tài)胞外囊泡必須超低溫冷凍保存的限制。

本品儲(chǔ)存條件為4℃即可穩(wěn)定存放，不需要?20℃冷凍保存，降低跨境運(yùn)輸、實(shí)驗(yàn)室儲(chǔ)存的冷鏈條件要求，減少樣品損耗。實(shí)驗(yàn)使用時(shí)加入無菌緩沖液簡單復(fù)溶就可直接開展實(shí)驗(yàn)，避免多次凍融循環(huán)造成囊泡破裂、生物活性下降，有效保障批次間實(shí)驗(yàn)重復(fù)性。

該款產(chǎn)品應(yīng)用場景覆蓋胞外囊泡表征、細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)、宿主?微生物互作等多個(gè)方向。表征檢測層面，可作為 NTA 納米顆粒跟蹤分析、透射電鏡TEM、WesternBlot、納米流式檢測的陽性參照樣品，用于儀器校準(zhǔn)、檢測方法學(xué)驗(yàn)證；細(xì)胞功能研究中，可直接刺激腸道上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等，探究乳酸菌胞外囊泡介導(dǎo)的抗炎效應(yīng)、緊密連接調(diào)控、免疫細(xì)胞活化等信號(hào)通路；腸道微生態(tài)研究方向，用于解析益生菌囊泡介導(dǎo)的宿主?菌群互作、腸道穩(wěn)態(tài)維持機(jī)制；同時(shí)也適用于益生菌候選制劑功能評估、囊泡載體藥物前期探索等基礎(chǔ)科研工作。

每一批次成品均執(zhí)行完整出廠質(zhì)量控制，對囊泡顆粒濃度、粒徑分布、標(biāo)志性膜組分、雜蛋白殘留、菌體殘留等指標(biāo)進(jìn)行檢測，完整留存質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)。科研人員無需搭建囊泡分離純化平臺(tái)，省去菌株培養(yǎng)、多步純化的繁瑣操作，規(guī)避自制樣本帶來的批次不穩(wěn)定、雜質(zhì)干擾等問題，幫助科研人員把精力聚焦于下游功能實(shí)驗(yàn)，獲得穩(wěn)定、可重復(fù)的科研實(shí)驗(yàn)結(jié)果。