短鏈脂肪酸通常指碳鏈長度為2~6個碳原子的飽和脂肪酸，是發(fā)酵過程的關(guān)鍵代謝產(chǎn)物，其組成與含量是評估發(fā)酵進程、代謝通路及工藝穩(wěn)定性的核心指標(biāo)。

一、檢測范圍與指標(biāo)

該檢測方案適用于厭氧發(fā)酵液、腸道微生物體外發(fā)酵液、食品發(fā)酵液、沼氣發(fā)酵液等各類生物發(fā)酵體系。常規(guī)檢測指標(biāo)包含直鏈SCFAs、支鏈SCFAs及衍生指標(biāo)三類，直鏈SCFAs具體包括酸(C2)、丙酸(C3)、丁酸(C4)、戊酸(C5)、己酸(C6)，其中前三者合計占總SCFAs的90%~95%，是檢測的核心關(guān)注指標(biāo);支鏈SCFAs包括異丁酸(iC4)、異戊酸(iC5)，屬于蛋白質(zhì)發(fā)酵特征產(chǎn)物，可指示發(fā)酵過程是否出現(xiàn)異常菌群代謝或污染;衍生指標(biāo)包含總SCFAs濃度、丙酸/酸比值、各組分占比，可用于評估發(fā)酵代謝流向、酸化風(fēng)險及功能活性。除上述指標(biāo)外，還可選擇乳酸含量、pH值、產(chǎn)氣量作為輔助指標(biāo)，完整還原發(fā)酵代謝軌跡。

二、主流檢測方法

目前發(fā)酵液SCFAs檢測以氣相色譜相關(guān)技術(shù)為金標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)靈敏度需求可選擇三類平臺。氣相色譜-氫火焰離子化檢測器(GC-FID)成本較低、定量準(zhǔn)確，對C2~C6組分分離效果好，適用于常規(guī)發(fā)酵工藝監(jiān)控、大批量樣本檢測;氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)定性能力強、靈敏度更高，可排除復(fù)雜基質(zhì)干擾，適用于科研研究、低豐度樣本檢測;高效液相色譜(HPLC)無需衍生化、前處理簡單，但短鏈組分分離度較差，易受雜質(zhì)干擾，僅適用于組分簡單的粗篩場景。檢測時推薦優(yōu)先選擇GC-FID或GC-MS平臺，采用FFAP毛細管色譜柱(聚二醇改性極性柱)實現(xiàn)各組分高效分離。

三、樣品前處理流程

根據(jù)樣品基質(zhì)復(fù)雜度可選擇兩種處理方式，對于澄清、低雜質(zhì)的發(fā)酵液可采用直接酸化法，首先取1~2mL發(fā)酵液樣品，在4℃、10000~12000 rpm條件下離心10~15 min，去除菌體及懸浮固體，將上清液過0.22μm水性微孔濾膜，隨后加入稀磷酸或酸化至pH<2，抑制短鏈脂肪酸解離后即可直接進樣分析。

對于高雜質(zhì)、低濃度的發(fā)酵液可采用液液萃取法，離心取上清液后，加入內(nèi)標(biāo)物(如2-基丁酸)提高定量準(zhǔn)確性，酸化至pH<2后，加入、甲基叔丁基等有機溶劑，渦旋振蕩萃取2~3次，合并有機相，經(jīng)氮吹濃縮后上機檢測;若采用衍生化法，可將萃取后組分與-甲醇/-甲醇在70~80℃水浴反應(yīng)30min，生成穩(wěn)定的脂肪酸甲酯后再進樣，可改善峰形、提高靈敏度。

青島菲優(yōu)特檢測有限公司已入駐喀斯瑪平臺(CASMART)，成為平臺認證技術(shù)服務(wù)供應(yīng)商，可直接對接全國高校、科研院所，提供合規(guī)高效的科研項目檢測服務(wù)。

菲優(yōu)特檢測服務(wù)內(nèi)容

1. 委托檢測：環(huán)境檢測、植物根/莖/葉/果實/籽粒檢測、海水檢測、土壤檢測、海底沉積物檢測、農(nóng)林植物類檢測、水產(chǎn)養(yǎng)殖檢測、微生物檢測、毒理測試等

2. 熱門產(chǎn)品：短鏈脂肪酸檢測、糖類分析、脂肪酸組成、氨基酸檢測、風(fēng)味物質(zhì)分析、單糖組成、土壤氨基糖檢測、分子量分布檢測、色素檢測、土壤八項指標(biāo)檢測、果實品質(zhì)檢測等

3. 科研服務(wù)：分子生物學(xué)、代謝組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細胞服務(wù)、細菌服務(wù)、新藥研發(fā)篩選模型構(gòu)建、疾病動物模型構(gòu)建及其他開放類服務(wù)項目