GB/T 《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 乙型溶血性鏈球菌檢測(cè)方法》標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)解析
標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)：GB/T
發(fā)布日期：2001年8月29日
實(shí)施日期：2002年5月1日
主管部門(mén)：科學(xué)技術(shù)部
歸口單位：全國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（TC281）
起草單位：中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)會(huì)
標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)：現(xiàn)行有效（Zui近一次復(fù)審于2023年12月28日，結(jié)論為繼續(xù)有效）
替代標(biāo)準(zhǔn)：全部代替GB/T
本標(biāo)準(zhǔn)適用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和兔等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的乙型溶血性鏈球菌檢測(cè)。
乙型溶血性鏈球菌是β溶血性的革蘭陽(yáng)性球菌，呈鏈狀排列，具有鏈激酶試驗(yàn)陽(yáng)性等生化特征。因此，可通過(guò)菌落生長(zhǎng)、菌體和生化反應(yīng)特征進(jìn)行鑒定。
樣本采集
采集部位：呼吸道分泌物或病灶組織、分泌物。
采集原則：嚴(yán)格無(wú)菌操作，避免交叉污染。樣本應(yīng)新鮮，具有代表性。
保存與運(yùn)輸：樣本需4℃冷藏保存，24小時(shí)內(nèi)送檢。超過(guò)時(shí)限需冷凍保存，解凍后立即檢測(cè)。
分離培養(yǎng)
培養(yǎng)基選擇：使用血瓊脂平皿進(jìn)行分離培養(yǎng)。
培養(yǎng)條件：將已接種的血瓊脂平皿置于（36±1）℃培養(yǎng)18-24小時(shí)。
菌落特征：在血瓊脂平皿上形成1.0mm左右，灰白色圓形，凸起，半透明或不透明，表面光滑，周?chē)?-4mm界限分明，無(wú)色透明溶血環(huán)（β溶血）的小菌落。
鑒定
鏈激酶試驗(yàn)陽(yáng)性：吸取草酸鉀人血漿0.2mL，加0.8mL滅菌生理鹽水，混勻，再加入24小時(shí)（36±1）℃培養(yǎng)的鏈球菌培養(yǎng)物0.5mL及0.25%氯化鈣0.25mL，振蕩搖勻，置于（36±1）℃水浴中10分鐘，血漿混合物自行凝固，然后觀察凝塊重新完全溶解的時(shí)間，完全溶解為陽(yáng)性，如24小時(shí)后不溶解即為陰性。
桿菌肽敏感試驗(yàn)陽(yáng)性：待檢菌株純培養(yǎng)物涂布于血瓊脂平皿上，用滅菌鑷子取每片含有0.04單位的桿菌肽紙片，放于瓊脂表面，于（36±1）℃培養(yǎng)24小時(shí)，如有抑菌帶出現(xiàn)即為陽(yáng)性，同時(shí)用已知陽(yáng)性菌株作為對(duì)照。
菌體特征：革蘭陽(yáng)性，球形或橢圓形，直徑0.6-1.0μm，呈鏈狀排列，短者4-8個(gè)，長(zhǎng)者20個(gè)左右。
生化試驗(yàn)：
陽(yáng)性報(bào)告：凡符合上述各項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果者作出陽(yáng)性報(bào)告，即菌體為革蘭陽(yáng)性球菌，呈鏈狀排列，鏈激酶試驗(yàn)陽(yáng)性，桿菌肽敏感試驗(yàn)陽(yáng)性，且菌落具有β溶血特征者，可判定為乙型溶血性鏈球菌。
陰性報(bào)告：不符合者作出陰性報(bào)告。
第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu) , 標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè) , 國(guó)標(biāo)檢測(cè) , 檢測(cè) , 檢測(cè)中心
第三方檢測(cè)技術(shù)服務(wù)，涂料檢測(cè)服務(wù)，環(huán)境生態(tài)監(jiān)測(cè)，計(jì)量檢測(cè)服務(wù)
一般項(xiàng)目：環(huán)境保護(hù)監(jiān)測(cè)；生態(tài)資源監(jiān)測(cè)；土地調(diào)查評(píng)估服務(wù)；工程和技術(shù)研究和試驗(yàn)發(fā)展；醫(yī)學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展；自然科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展；農(nóng)業(yè)科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展；終端計(jì)量設(shè)備銷(xiāo)售；計(jì)量技術(shù)服務(wù)；標(biāo)準(zhǔn)化服務(wù)；公路水運(yùn)工程試驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)；進(jìn)出口商品檢驗(yàn)鑒定；環(huán)保咨詢(xún)服務(wù)；環(huán)境應(yīng)急治理服務(wù)（除許可業(yè)務(wù)外，可自主依法經(jīng)營(yíng)法律法規(guī)非禁止或限制的項(xiàng)目）許可項(xiàng)目：檢驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)；特種設(shè)備
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