飼料GB/T18246-2000飼料中氨基酸的測定酸水解第三方檢測機構,GB/T18246-2000國標檢測-國產精品色吧國產精品_頂級少婦做爰視頻在線觀
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GB/T 18246-2000《飼料中氨基酸的測定》中酸水解法的核心要點如下:
適用于配合飼料、濃縮飼料、添加劑預混合飼料、單一飼料和預混料中氨基酸總量和添加游離氨基酸的測定。
酸水解法特別適用于含動、植物蛋白的單一飼料、配合飼料、濃縮飼料和預混料中氨基酸總量的測定,但不能測定色氨酸。
原理:使飼料蛋白在110℃、c(HCl)=6mol/L作用下,水解成單一氨基酸,再經離子交換色譜法分離并以茚三酮做柱后衍生測定。
特點:色氨酸全部破壞,不能測量;胱氨酸和蛋氨酸部分氧化,不能測準。
適用對象:除含硫氨基酸(胱氨酸和蛋氨酸等)以外的蛋白水解氨基酸。
原理:將飼料蛋白中的含硫氨基酸(胱氨酸、半胱氨酸和蛋氨酸等)用過甲酸氧化,然后進行酸解,再經離子交換色譜分離、測定。
特點:
以偏重亞鈉為氧化終止劑時,適于測定除酪氨酸以外的蛋白水解氨基酸。
以氫溴酸為終止劑時,適于測定除酪氨酸、苯丙氨酸和組氨酸以外的蛋白水解氨基酸。
適用對象:特定條件下的蛋白水解氨基酸測定。
樣品制備:
取具代表性的飼料樣品,用四分法縮減分取25g左右,粉碎并過0.25mm孔徑(60目)篩,充分混勻后裝入磨口瓶中備用。
水解:
常規(guī)水解法:稱取含蛋白7.5-25mg的試樣(約50-100mg,準確至0.1mg)于20mL安瓶中,加10.00ml酸解劑(c(HCl)=6mol/L溶液),置液氮或干冰-乙醇()中冷凍,然后抽真空至7Pa后封口。將水解管放在(110±1)℃恒溫干燥箱中,水解22-24h。
氧化水解法:按GB/T 15399-1994中7.1規(guī)定操作。
處理與測定:
水解完成后,冷卻,混勻,開管,過濾。用移液管吸取適量的濾液,置旋轉蒸發(fā)器或濃縮器中,60℃抽真空,蒸發(fā)至干。必要時加少許水,重復蒸干1-2次。
加入稀釋上機用檸檬酸鈉緩沖液(pH2.2,c(Na+)=0.2mol/L),使樣液中氨基酸濃度達50-250nmol/ml,搖勻,過濾或離心,取上清液上機測定。
使用氨基酸自動分析儀(茚三酮柱后衍生離子交換色譜儀)進行測定,要求各氨基酸的分辨率大于90%。
樣品均勻性:樣品的代表性直接影響結果準確性,須兼顧批次差異。
水解條件控制:過度或不足水解均會影響氨基酸釋放,需嚴格控制水解時間和溫度。
儀器校準和維護:定期校準設備,確保檢測靈敏度和準確性。
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