以下是關(guān)于《水質(zhì) 五日生化需氧量（BOD?）的測(cè)定 稀釋與接種法》（HJ505-2009）中量法部分的詳細(xì)解析，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)要求與操作要點(diǎn)整理：

一、方法原理（量法核心）

核心反應(yīng)：
在五日培養(yǎng)（20±1℃）過(guò)程中，微生物分解水樣中的有機(jī)物消耗溶解氧（DO）。培養(yǎng)前后通過(guò)量法測(cè)定溶解氧含量，差值即為BOD?。

溶解氧測(cè)定原理：
酸性條件下，水中的溶解氧與化鉀反應(yīng)生成，再用硫代鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定析出的，根據(jù)硫代鈉消耗量計(jì)算溶解氧濃度（mg/L）。
反應(yīng)式：

O2+4KI+4H+→2I2+4K++2H2O

I2+2Na2S2O3→2NaI+Na2S4O6

與稀釋接種法的關(guān)系：
量法是稀釋接種法中測(cè)定溶解氧的關(guān)鍵步驟，適用于高濃度水樣（需稀釋?zhuān)┗虻蜐舛人畼樱ㄖ苯訙y(cè)定），需結(jié)合接種操作（添加微生物菌種）確保分解反應(yīng)完全。

二、儀器與試劑

儀器：

溶解氧瓶：250-300mL，完全充滿水樣，避免氣泡。

滴定管：25mL或50mL，酸式（用于硫代鈉）。

磁力攪拌器：用于溶解氧測(cè)定時(shí)的攪拌。

生化培養(yǎng)箱：20±1℃，用于五日培養(yǎng)。

移液管、吸量管、量筒：準(zhǔn)確量取水樣、稀釋水、接種液。

試劑：

稱取6.2g Na?S?O?·5H?O溶于煮沸放冷的水，稀釋至1L，標(biāo)定濃度。

稱取500g NaOH溶于水，稀釋至1L（A液）；

稱取150g KI和10g NaN?溶于水，稀釋至1L（B液）；

使用前等體積混合A、B液。

錳溶液：稱取480g MnSO?·H?O溶于水，稀釋至1L。

堿性化鉀-溶液：

濃（ρ=1.84g/mL）。

淀粉指示劑：0.5g可溶性淀粉溶于100mL沸水。

硫代鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.025mol/L）：

三、分析步驟（量法核心操作）1. 水樣采集與預(yù)處理

采集：用溶解氧瓶充滿水樣，避免曝氣或殘留氣泡，立即加蓋密封。

預(yù)處理：

若水樣含余氯，加入適量硫代鈉溶液（1mL 0.01mol/L）去除。

若水樣pH>9或<6.5，用稀或氫氧化鈉調(diào)節(jié)至中性。

2. 溶解氧測(cè)定（量法）

固定溶解氧：
向溶解氧瓶中加入1mL錳溶液和2mL堿性化鉀-溶液，蓋緊瓶塞，顛倒混勻數(shù)次，靜置至沉淀生成（約5分鐘）。

酸化析出：
加入2mL濃，蓋緊瓶塞，顛倒混勻至沉淀完全溶解，放置暗處5分鐘。

滴定：
將溶液轉(zhuǎn)移至250mL錐形瓶，用硫代鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至淡黃色，加入1mL淀粉指示劑，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，記錄硫代鈉體積（V?）。

3. 稀釋與接種（針對(duì)高濃度水樣）

稀釋水：將蒸餾水通入空氣曝氣至少24小時(shí)，使溶解氧接近飽和（約8-9mg/L），pH=7.2±0.1。

接種液：取自處理該水樣的污水處理廠曝氣池混合液，或含活性污泥的廢水。

稀釋操作：

根據(jù)水樣BOD?預(yù)估值，按比例加入稀釋水和接種液（如1:9、1:19等），使Zui終BOD?在2-6mg/L范圍內(nèi)。

混合均勻后，分裝至溶解氧瓶，按上述步驟測(cè)定初始溶解氧（DO?）。

4. 五日培養(yǎng)與終溶解氧測(cè)定

將裝滿水樣的溶解氧瓶置于20±1℃培養(yǎng)箱中，避光培養(yǎng)5天。

培養(yǎng)結(jié)束后，按步驟2重復(fù)測(cè)定終溶解氧（DO?）。

四、計(jì)算與結(jié)果表示

溶解氧濃度計(jì)算：

DO (mg/L)=V2V1×C×8×1000

V1：硫代鈉溶液體積（mL）；

C：硫代鈉濃度（mol/L）；

V2：水樣體積（mL）；

8：氧的摩爾質(zhì)量（g/mol）。

BOD?計(jì)算：

BOD5(mg/L)=V1(DO0?DO5)×(V1+V2)

DO0：初始溶解氧（mg/L）；

DO5：終溶解氧（mg/L）；

V1：水樣體積（mL）；

V2：稀釋水體積（mL）。

簡(jiǎn)化公式（直接測(cè)定）：

BOD5=DO0?DO5

五、質(zhì)量控制與注意事項(xiàng)

溶解氧測(cè)定關(guān)鍵點(diǎn)：

錳和堿性化鉀溶液需新鮮配制，避免沉淀失效。

滴定速度不宜過(guò)快，接近終點(diǎn)時(shí)逐滴加入。

淀粉指示劑需在近終點(diǎn)時(shí)加入，避免過(guò)早加入導(dǎo)致藍(lán)色褪去緩慢。

稀釋與接種要點(diǎn)：

稀釋比例需根據(jù)水樣BOD?預(yù)估值確定，避免過(guò)高（DO?<2mg/L）或過(guò)低（DO?-DO?<0.5mg/L）。

接種液需含活性微生物，且接種量不超過(guò)水樣體積的10%。

干擾消除：

重金屬抑制：加入EDTA掩蔽劑（如0.4g/L）。

氯離子干擾：加入硫代鈉去除余氯。

硝酸鹽干擾：加入丙烯基硫脲（0.5mg/L）抑制硝化作用。

六、標(biāo)準(zhǔn)更新說(shuō)明

HJ 505-2009已替代《水質(zhì) 五日生化需氧量（BOD?）的測(cè)定 稀釋與接種法》（GB7488-1987），主要更新內(nèi)容包括：

明確量法為溶解氧測(cè)定的推薦方法；

細(xì)化稀釋與接種操作步驟；

增加質(zhì)量控制要求（如平行樣、空白試驗(yàn)）。

實(shí)際應(yīng)用建議：

嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)要求控制培養(yǎng)溫度和時(shí)間；

定期標(biāo)定硫代鈉溶液濃度；

對(duì)高鹽、高毒或難降解廢水，需優(yōu)化接種液和稀釋比例。