抗氧化酶是超氧化物歧化酶、硫氧還蛋白過氧化物酶、谷胱甘肽過氧化物酶和過氧化氫酶等的統(tǒng)稱。抗氧化酶具有將體內(nèi)形成過氧化物轉(zhuǎn)換為毒害較低或無害的物質(zhì)的功效。定義一旦在體內(nèi)形成過氧化物，它們即刻發(fā)揮作用，利用氧化還原作用將過氧化物轉(zhuǎn)換為毒害較低或無害的物質(zhì)。概念酶是生物體內(nèi)活細胞產(chǎn)生的一種生物催化劑，其中抗氧化酶能夠起到減緩氧化速度的作用。

檢測方法

1.超氧化物歧化酶（SOD）活性測定方法

SOD能夠催化超氧陰離子（O2）的還原反應，將其轉(zhuǎn)化為較為穩(wěn)定的氧氣和過氧化氫。常見的SOD活性測定方法有：

標準醛縮法：根據(jù)SOD催化的還原反應，利用NBT（硝基藍鹽）和醛縮劑的變色反應來測定SOD活性。

自動化測定法：利用包含其中一種還原物質(zhì)和pH染料的較為穩(wěn)定的底物，通過測定底物的氧化程度來確定SOD活性。

XTT法和WST1法：由于SOD具有還原型的性質(zhì)，可以通過測定細胞培養(yǎng)基中的還原型瓊脂糖（XTT）或水溶性四硝基噻唑鹽（WST1）的還原動力學來測定其活性。

2.過氧化氫酶（CAT）活性測定方法：CAT主要參與還原過氧化氫（H2O2），將其轉(zhuǎn)化為氧和水。常見的CAT活性測定方法有：

色素法：利用黃曲霉素作為還原劑，觀察黃曲霉素的消費量來測定CAT活性。

光度法：通過測定樣品中H2O2濃度的下降程度來間接測定CAT活性。

氧化還原電極法：通過測定樣品中H2O2濃度的下降速度來測定CAT活性。

3.過氧化物酶（POD）活性測定方法：POD主要參與氧氣與還原型供體之間的氧化還原反應，轉(zhuǎn)化為過氧化物（ROO）。常見的POD活性測定方法有：

色譜法：利用酚類底物的氧化反應，測定產(chǎn)生的醌類產(chǎn)物的含量來測定POD活性。

酶標法：POD催化氧化反應會形成有色產(chǎn)物，通過測定產(chǎn)物的吸光度來測定POD活性。

檢測步驟

抗氧化酶活性的測定方法主要包括以下幾個步驟：

1、樣本處理

使用磷酸緩沖鹽水(PBS)洗滌細胞或組織樣本以去除雜質(zhì)，然后使用超聲波分散器處理樣本以破碎細胞膜，使細胞內(nèi)的抗氧化酶完全釋放。將樣本轉(zhuǎn)移到離心管中，使用超低溫離心機離心10分鐘，去除殘留物。

2、酶的吸附

取一定量的離子交換樹脂，裝入柱中，使其充分吸附抗氧化酶。將破碎的樣本溶液緩慢滴入柱中，讓抗氧化酶與樹脂結合。使用PBS洗滌柱上的抗氧化酶，去除非特異性結合物。

3、活性測定

使用活性酯酶底物測量抗氧化酶的活性。通過底物的降解速率可以測定抗氧化酶活性。

此外，還有一些特定的抗氧化酶活性測定方法，如超氧化物歧化酶(SOD)的氮藍四唑光化還原法，這包括試劑的配制和酶活性的測定。這些方法提供了對特定抗氧化酶活性水平的準確測量，有助于了解細胞的氧化應激狀態(tài)。

檢測標準

1、YY/T 1458-2016抗甲狀腺過氧化物酶抗體定量檢測試劑(盒)(化學發(fā)光免疫分析法)

2、DB35/T 1148-2011 原料用超氧化物歧化酶

3、T/CBFIA 02003-2023 葡萄糖氧化酶制劑

4、HG/T 4657-2014 紡織染整助劑 過氧化氫酶酶活力的測定

5、GB/T 41906-2022 超氧化物歧化酶活性檢測方法