微核試驗(yàn)是檢測(cè)染色體或有絲分裂器損傷的一種遺傳毒性試驗(yàn)方法。無著絲粒的染色體片段或因紡錘體受損而丟失的整個(gè)染色體，在細(xì)胞分裂后期仍留在子細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)成為微核。常用的是嚙齒類動(dòng)物骨髓嗜多染紅細(xì)胞(PCE)微核試驗(yàn)。以受試物處理嚙齒類動(dòng)物，然后處死，取骨髓，制片、固定、染色，于顯微鏡下計(jì)數(shù)PCE中的微核。如果與對(duì)照組比較，處理組PCE微核率有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的增加，并有劑量-反應(yīng)關(guān)系，則可認(rèn)為該受試物是哺乳動(dòng)物體細(xì)胞的致突變物。人外周淋巴細(xì)胞微核試驗(yàn)，可用于接觸環(huán)境致突變物的人群的監(jiān)測(cè)和危險(xiǎn)性評(píng)價(jià)。

種類

1、常規(guī)微核試驗(yàn)

利用細(xì)胞生物學(xué)方法經(jīng)顯微制片后在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)待測(cè)材料微核率的方法。這是普遍采用的基本方法，可以分為兩類：

1)將微核試驗(yàn)材料，在加人待測(cè)物質(zhì)的環(huán)境中培養(yǎng)一段時(shí)間，染色制片，顯微觀察計(jì)算微核率。

2)直接將受遺傳毒理損害生物的相應(yīng)材料制片，顯微觀察計(jì)算微核率。

2、熒光原位雜交試驗(yàn)與DNA探針

熒光原位雜交（Flu-orescenceinsituhybridization，F(xiàn)ISH)技術(shù)是近年來開展起來的分子生物學(xué)新技術(shù)。它是使用生物熒光素標(biāo)記的各類DNA和RNA探針與細(xì)胞或組織在玻片上進(jìn)行原位雜交，被觀察的特定DNA片段(或序列)在熒光顯微鏡下固定在細(xì)胞核或染色體的原有部位顯示熒光。利用熒光原位雜交試驗(yàn)可以檢測(cè)是染色體斷裂還是染色體丟失，以及可以判斷是哪一條染色體，那一段所產(chǎn)生的微核。目前已成功用于MN實(shí)驗(yàn)的DNA探針主要有兩類：

第一類：是含DNA重復(fù)序列的探針，主要用于檢測(cè)染色體著絲粒的DNA。

第二類：是含染色體端粒DNA序列的探針，它主要顯示染色體臂的存在。

關(guān)于微核試驗(yàn)，北京清析技術(shù)研究院可提供小鼠微核試驗(yàn)、骨髓微核試驗(yàn)、體內(nèi)微核試驗(yàn)、大鼠微核試驗(yàn)、細(xì)胞微核試驗(yàn)、植物微核試驗(yàn)、遺傳微核試驗(yàn)、藥物微核試驗(yàn)等檢測(cè)項(xiàng)目。同時(shí)，北京清析技術(shù)研究院可對(duì)常規(guī)微核試驗(yàn)、細(xì)胞分裂阻滯微核分析法、熒光原位雜交試驗(yàn)與DNA探針與抗著絲?？贵w染色等進(jìn)行微核試驗(yàn)。

試驗(yàn)方法

1、動(dòng)物體內(nèi)細(xì)胞微核：主要有骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)；外周血淋巴細(xì)胞微核試驗(yàn)。

2、細(xì)胞培養(yǎng)微核試驗(yàn)；

3、蠶豆根尖微核試驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)所用的蠶豆為松滋青皮豆，通過浸種、催芽、染毒、恢復(fù)培養(yǎng)、固定、孚爾根染色等步驟后，進(jìn)行鏡檢。

試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)

1、GB/T 21773-2008化學(xué)品.體內(nèi)哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞微核試驗(yàn)方法

2、GB/T 28646-2012化學(xué)品.體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞微核試驗(yàn)方法

3、HJ 1016-2019 水質(zhì) 致突變性的鑒別蠶豆根尖微核試驗(yàn)法

4、GB 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞微核試驗(yàn)

5、GB 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)　體外哺乳類細(xì)胞微核試驗(yàn)

6、YY/T 0870.6-2019 醫(yī)療器械遺傳毒性試驗(yàn)第6部分：體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞微核試驗(yàn)

7、DIN ISO 29200 E:2012-06 土質(zhì)高等植物遺傳毒性效應(yīng)的評(píng)估 蠶豆微核試驗(yàn)

8、DB22/T 396.7-2017 保健用品毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序與檢驗(yàn)方法第7部分：嚙齒動(dòng)物微核試驗(yàn)

9、UNI EN ISO 29200:2020 土壤質(zhì)量對(duì)高等植物遺傳毒性影響的評(píng)估 蠶豆微核試驗(yàn)

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