通用名：豬藍(lán)耳病毒IgG抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）-國(guó)產(chǎn)人妻精品區(qū)一區(qū)二區(qū)三區(qū)|色欲精品國(guó)產(chǎn)AV久久久

英文名：Diagnostic Kit for Antibodies to Porcine Reproductive andRespiratory Syndrome Virus (ELISA)

 

【包裝規(guī)格】 96T/盒

 

本試劑盒用于檢測(cè)豬血清中豬藍(lán)耳病毒抗體。評(píng)估豬場(chǎng)豬藍(lán)耳苗免疫狀況，感染豬的血清學(xué)診斷。

 

本試劑盒系由預(yù)包被豬藍(lán)耳病毒（PRRSV）GP5+GP6重組蛋白的微孔板和酶標(biāo)記二抗及其他配套試劑組成，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測(cè)豬血清或血漿中豬藍(lán)耳病毒特異性抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)，在包被板中加入對(duì)照血清和稀釋的待檢血清，經(jīng)溫育后，若樣品中含有豬藍(lán)耳病毒的特異性抗體，則將與包被板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后；再加入酶標(biāo)二抗，與包被板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，在孔中加TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有特異性抗體。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

【樣品制備】 取動(dòng)物全血，按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無(wú)溶血、無(wú)污染。樣品短期可于2～8℃保存，長(zhǎng)期需置-20℃保存。

 

【樣品稀釋】 用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋（如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽(yáng)性對(duì)照不用稀釋。

【洗滌液配制】濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫（25℃左右），并搖動(dòng)使沉淀的鹽溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。

2.取所需用量包被微孔板條，設(shè)空白、陰性及陽(yáng)性對(duì)照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。

3.陰性、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰性、陽(yáng)性對(duì)照血清100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的血清樣本100μl；空白對(duì)照孔不加。

4.混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。

5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。

6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘。

7.洗滌，同步驟5。

8.每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。

9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm(630nm作參比波長(zhǎng)）測(cè)定各孔吸光值（A450）。

 

定義：N=陰性對(duì)照孔平均A值；P=陽(yáng)性對(duì)照孔平均A值；S=樣品孔A值；S/P=樣品孔A值/陽(yáng)性對(duì)照孔平均A值。

1.正常情況下，N≤0.10，P≥0.50。

2.S/P≥0.18時(shí)判為陽(yáng)性，S/P＜0.15時(shí)判為陰性，0.15≤S/P＜0.18時(shí)判為可疑。

當(dāng)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性時(shí)表明豬只抗體水平不足，建議補(bǔ)打相應(yīng)疫苗。

 

該試驗(yàn)僅作為定性檢測(cè)豬藍(lán)耳病毒IgG抗體，不能區(qū)別疫苗免疫和野毒感染。