化學(xué)品溞類急性活動抑制試驗(yàn) 

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化學(xué)品類急性活動抑制試驗(yàn)的原理、儀器和設(shè)備、試驗(yàn)準(zhǔn)備、試驗(yàn)程序、質(zhì)量保證與質(zhì)量控制、數(shù)據(jù)與報(bào)告。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于測試與評價(jià)可能暴露于水生生態(tài)環(huán)境的化學(xué)品對類急性活動的抑制作用。

2術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

半數(shù)效應(yīng)濃度（E00）median effective concentration 引起50％的受試活動抑制的受試物濃度。

活動抑制immobilisation

輕晃試驗(yàn)容器，15 s內(nèi)體不能游動，視為活動受到抑制。

3受試物信息

a) 結(jié)構(gòu)式；

b) 純度；

c) 水中溶解度；

d)蒸氣壓；

e)在水中和光中的化學(xué)穩(wěn)定性

f) 正辛醇一水的分配系數(shù)；

在水溶液中的可靠的定量分析方法、回收率以及檢測限；

快速生物降解性試驗(yàn)結(jié)果。

4 原理

幼溞（試驗(yàn)開始時齡小于24 h）以一定的濃度范圍暴露于受試物溶液中48 h，相對于空白對照組，觀察記錄24 h和48h受試物對類活動抑制情況。通過對結(jié)果分析計(jì)算48 h的EC50亦可選 24 h的EC50結(jié)果。

5參比物

推薦使用****（K2Cr207），其24 hEC50值范圍為0· 6 mg/L-2.1 mg/L，參見參考文獻(xiàn)[ 1 ]、

6儀器和設(shè)備

6 ·1接觸到試驗(yàn)溶液的試驗(yàn)容器和其他設(shè)備**是全玻璃制品或由其他化學(xué)惰性材料制成。試驗(yàn)容器通常為試管或燒杯，每次使用前必須按照標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室程序清洗干凈；試驗(yàn)容器應(yīng)便于加蓋，以減少水分蒸發(fā)造成的損失，并避免灰塵進(jìn)人溶液。揮發(fā)性物質(zhì)應(yīng)在足夠大的完全密閉的容器中進(jìn)行，以免溶解氧受限或過低。

6. 2需用下列部分或全部儀器設(shè)備：

一一溶解氧儀（帶有微電極或其他能夠測定少量樣品的溶解氧濃度的適當(dāng)裝置）； pH計(jì)；

一一一適當(dāng)?shù)臏囟瓤刂圃O(shè)備；總有機(jī)碳（TOC）測定儀；化學(xué)需氧量（COD）測定儀；一一測定水硬度的設(shè)備等。

7試驗(yàn)準(zhǔn)備

7· 1受試生物

**大型溞，也可用其他溞類。

7· 2試驗(yàn)液

a)選擇的試驗(yàn)液濃度一般稀釋而成。貯備液將受加人到試驗(yàn)用水中配制而成。應(yīng)盡量避免使用助、乳化齊口有時需用這些物質(zhì)來配制適當(dāng)濃度的貯備液。有關(guān)助溶劑、乳化齊口劑的準(zhǔn)則見參考【4】。任何情況下，受試物的濃度不能超過其在試驗(yàn)用水中的溶解度。

b)通常不能調(diào)節(jié)試驗(yàn)液的pH值。如果溶液的pH不在6、9范圍內(nèi)，調(diào)節(jié)貯備液的pH值同時進(jìn)行第二套試驗(yàn)。調(diào)節(jié)pH值可以使用HCI或NaOH，但必須保證貯備液的性質(zhì)、濃度不發(fā)生改變，即不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)或沉淀作用。

8質(zhì)量保證與質(zhì)量控制

對照組（包括空白對照組和溶劑對照抑制率不能超過10％；其受抑制情況包括：活動受抑制、有疾病癥狀或受損傷，例如變色、行為異常（如飄浮于液面）等。

試驗(yàn)結(jié)束時對照組和試驗(yàn)組的溶解氧濃度應(yīng)不小于3 mg/L。

9數(shù)據(jù)與報(bào)告

9· 1數(shù)據(jù)

以表格形式列出24 h和48 h對照組和各試驗(yàn)組試驗(yàn)溢數(shù)、活動受抑制數(shù)及百分率。以24 h 和48h抑制百分率與受試物濃度作劑量-效應(yīng)曲線，選擇合適的統(tǒng)計(jì)方法（如概率單位法）計(jì)算 24 h EC50（可選）和48 hEC50及其95％的置信區(qū)間。

當(dāng)獲得的數(shù)據(jù)使用標(biāo)準(zhǔn)的方法無法統(tǒng)計(jì)時，無抑制作用的*高濃度和引起100％抑制的*低濃度可用于推導(dǎo)EC50（可以認(rèn)為其為兩者濃度的幾何平均值）。

9· 2試驗(yàn)報(bào)告

試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)包括以下內(nèi)容：

9 · 2· 1受試物

a)物理屬性和相關(guān)理化性質(zhì)；

b)化學(xué)標(biāo)識鑒別數(shù)據(jù)，包括純度。

9 · 2· 2受試生物

類的來源和種類，提供者（若已知），培養(yǎng)條件（包括食物的種類、來源、喂食量以及喂食頻率）。

9 · 2· 3試驗(yàn)條件

試驗(yàn)容器：試驗(yàn)容器的類型與體積，試驗(yàn)液的體積，每個容器中溞類的數(shù)量，每個濃度的平行數(shù)；

儲備液和試驗(yàn)液制備的方法，包括助溶劑、分散劑和乳化劑的使用及其濃度；

試驗(yàn)用水：來源和水質(zhì)特征。若使用重組水，應(yīng)提供其組成和制備方法；

培養(yǎng)條件：溫度、光照強(qiáng)度、光照周期、溶解氧、PH值等；

9 · 2·4 結(jié)果

各觀察時間點(diǎn)內(nèi)，對照組和試驗(yàn)組中溞類活動受抑制或行為異常的數(shù)量和百分?jǐn)?shù)；

參比物的實(shí)驗(yàn)結(jié)果；

每個容器中受試物的配置濃度和所以分析測定受試物濃度的結(jié)果，分析方法的回收率和檢測限；

試驗(yàn)期間水質(zhì)測定結(jié)果，包括溫度、PH值、溶解氧等；

24 h EC50（可選）和48 hEC50及其95％的置信區(qū)間，以及劑量-效應(yīng)曲線及其標(biāo)準(zhǔn)誤差。用于計(jì)算EC50的統(tǒng)計(jì)程序；

若出現(xiàn)偏離，需說明偏離及其對試驗(yàn)結(jié)果的影響。