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β-內酰胺酶測量分析儀酸測量法:
青霉被β-內酶胺酶水解后成青霉酸,pH值下降到6.8以下,用酚紅指示劑,內酰胺酶測量多少錢,由紅(紫)色(原液:枸櫞酸緩沖液pH8.5)→黃色(pH6.8以下);淀粉-碘測定法:β內酰胺酶破壞β內酰胺環(huán),碘與被打開β內酰胺環(huán)結合,使藍色的淀粉-碘復合物轉變成無色。β-內酰胺酶是多種不同類型以β-內酰胺類為底物的降解酶,通過水解β-內酰胺環(huán)造成β-內酰胺類失去活性,將待測菌與頭硝作用一定時間后,乳制品內酰胺酶測量多少錢,如待測菌產生青霉酶,則可水解頭硝的β-內酰胺環(huán),顏色由黃色變?yōu)榧t色。
β-內酰胺酶測量分析儀機制
細菌在和抗生素戰(zhàn)斗時,也會提高裝備保護自己。細菌們自己研發(fā)出了一套具有防護盾功能的裝備,稱為β-內酰胺酶(其實是人類給它命名的)。這是由細菌產生的一種保護性酶。這個酶可以使某些β-內酰胺類抗生素,在還沒有到達細菌的作用部位之前,牛奶內酰胺酶測量多少錢,就將其水解,令其失活。這是細菌對β-內酰胺類抗生素產生耐藥性的主要機制。
β-內酰胺酶測量分析儀碘量法
[原理]β-內酰胺酶能裂解青霉的β-內酰胺環(huán)形成青霉唑酸,它與淀粉競爭游離碘,破壞了碘和淀粉的蘭色復合物,使蘭色變?yōu)闊o色。
[方法] ①將0.25克.青霉溶于41.7mlPH6.0的磷酸鹽緩沖液中,使其濃度成6000ug/ml。 取0.1ml
于一小試管中。
②將培養(yǎng)18-24小時的細菌在含青霉試管內制成濃厚菌懸液(109/ml)。
③在37"C水浴中放置30分鐘,乳制品內酰胺酶測量多少錢,不時搖動,使酶能破壞青霉。
④加入1%可溶性淀粉溶液0.5ml,搖勻。
⑤加入碘液0.02 ml。
⑥在37°C水浴中放置10分鐘,觀察結果。
[結果]在10分鐘內能使蘭色完全消退的菌株為β-內酰胺酶陽性,不消退者為陰性。
[注意事項]
①由于青霉很容易分解,因而用于實驗的青霉應新鮮配制。
②淀粉也新鮮配制,在100ml蒸餾水中加入1克可溶性淀粉,放到開水中水浴直到淀粉溶解。
③實驗應按照步驟操作,如果碘加得過早,酶反應就會停止,產生假陰性結果。
④每次試驗用陽性和陰性對照。
分析儀器制造,電位滴定儀,卡氏水分儀,抑菌圈測量儀等
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