粗蛋白

粗蛋白的測(cè)定一般采用GB/T6432-2018《飼料中粗蛋白的測(cè)定凱氏定氮法》。

(1)樣品的粉碎粒度:要求粉碎后全部通過(guò)0.42mm標(biāo)準(zhǔn)篩。樣品粒度會(huì)對(duì)分析時(shí)間和測(cè)量效果產(chǎn)生影響，需要根據(jù)不同的樣品物理性質(zhì)及蛋白質(zhì)含量對(duì)樣品進(jìn)行粉碎,過(guò)篩；

(2)合適的稱樣量:根據(jù)待測(cè)樣品中粗蛋白含量的高低，預(yù)估標(biāo)準(zhǔn)溶液的使用量,保證滴定體積在10mL以上，一般魚(yú)粉、肉粉、羽毛粉、玉米蛋類飼料原料稱樣量為0.25g左右，豆粕、棉粕、濃縮飼料稱樣量為0.40g左右，配合飼料稱樣量為0.50g左右,玉米、次粉類樣品稱樣量為0.80g左右, 一般樣品加入6.4g混合催化劑和12mL即可，稱樣量大的樣品在消解時(shí)可適當(dāng)補(bǔ)加3~5mL。研究表明,消化過(guò)程中催化劑的性質(zhì)和用量對(duì)終結(jié)果有顯著影響；

(3)消解溫度和時(shí)間一般控制在420°C、4h左右。當(dāng)消解液為澄清的藍(lán)綠色時(shí),代表消解完全；如消解液為渾濁狀，則消解不完全,可能的原因有消解溫度偏低、消解時(shí)間不夠等,需提高消解溫度或延長(zhǎng)消解時(shí)間；

(4)消解過(guò)程控制:為防止爆沸導(dǎo)致消化液沾壁、消解不徹底，消解溫度應(yīng)逐漸升高；若樣品水分含量較高，鐘消解會(huì)發(fā)生暴沸，可以選擇程序升溫,180°C維持30min,270°C維持30 min,420°C維持2~3h；

(5)高肪或高糖類樣品在消解時(shí)應(yīng)注意防止產(chǎn)生大量泡沫，該類樣品稱完樣后可在消解液中浸泡2h后再進(jìn)行消解；

(6)蒸餾裝置要保持良好的氣密性,防止漏氣，使用前用銨(99.9%)進(jìn)行檢查，要求銨含氮量在21.19%+0.20%；

(7)消化爐的消解孔不能有空位置,可以用空白消化管加補(bǔ)位；

(8)定期檢查各消解孔溫度的均勻性,溫度偏低的孔會(huì)造成消解不完全,結(jié)果偏低?？捎酶骺紫鉁y(cè)定同一飼料,結(jié)果與平均結(jié)果的精密度超出國(guó)標(biāo)要求范圍的孔標(biāo)記不用；

(9)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度一般控制在0.1mol/L+5%范圍內(nèi)(具體請(qǐng)參照GB/T601-2016<化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備》）；在滴定時(shí),標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度過(guò)低會(huì)消耗過(guò)多的滴定液,造成試劑浪費(fèi)，濃度過(guò)高則消耗的滴定液過(guò)少，導(dǎo)致較大的系統(tǒng)誤差。配制標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)，需要標(biāo)定后使用；

(10)混合指示液不可存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，否則乙醇揮發(fā)會(huì)導(dǎo)致指示終點(diǎn)顏色發(fā)生變化,儲(chǔ)存時(shí)應(yīng)注意室溫避光、密封保存，有效期為3個(gè)月。經(jīng)驗(yàn)表明,夏季2周、冬季4周內(nèi)使用效果；

(11)硼吸收液盡量現(xiàn)用現(xiàn)配，儲(chǔ)存時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，全自動(dòng)程序使用時(shí)室溫可保存1個(gè)月，否則硼氨分解揮發(fā)，導(dǎo)致結(jié)果偏低；

(12)要保證蒸餾過(guò)程中的堿性環(huán)境,加堿要過(guò)量,一般是加入量的4倍，如在蒸餾過(guò)程中加堿后消解液的顏色沒(méi)有變黑，要立即停止蒸餾,并補(bǔ)加氫氧化鈉溶液至消解液變黑；

(13)蒸餾過(guò)程中長(zhǎng)時(shí)間使用高濃度氫氧化鈉溶液，管路內(nèi)部會(huì)形成固體結(jié)晶,造成管路爾從而減少加堿量,甚至無(wú)法加堿。因此應(yīng)定期將氫氧化鈉溶液換成溫蒸餾水對(duì)管路進(jìn)行清洗；

(14)使用蔗糖代替樣品進(jìn)行空白測(cè)定，空白試驗(yàn)應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)要求，如果滴定體積過(guò)大,應(yīng)檢查試劑質(zhì)量；

(15)通過(guò)有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或質(zhì)控樣品來(lái)驗(yàn)證結(jié)果的準(zhǔn)確性。