這些抗Arf 6-GTP單克l隆抗l體還可用于通過免l疫組織化學(xué)監(jiān)測細(xì)胞和組織中Arf 6的激l活。

NewEast Biosciences Arf6激l活測定試劑盒提供了一種簡單且快速的方法來監(jiān)測Arf6的激l活。每個試劑盒均提供足夠的量以執(zhí)行20個測定。

NewEast Biosciences Arf 6激l活檢測試劑盒基于特定于配置的抗Arf6-GTP單克l隆抗l體，可從細(xì)胞提取物或體外載有GTPγS的Arf 6激l活檢測方法來測量活性Arf 6-GTP水平。簡而言之，抗活性的Arf 6小鼠單克l隆抗l體將與含有Arf 6-GTP的細(xì)胞裂解液一起孵育。 然后，結(jié)合的活性Arf 6將被蛋白A/ G瓊脂糖拉低。 分別使用抗Arf 6兔多克l隆抗l體通過免l疫印跡分析檢測沉淀的活性Arf 6。

體外用GTPγS/GDP處理蛋白以用作陽性和陰性的對照

注意：在細(xì)胞體內(nèi)環(huán)境條件下大約有10%的Cdc42被激l活，而在體外用GTPγS處理大約有90%的Cdc42被激l活。

1. 準(zhǔn)備兩個離心管，Rac kit，每個管中各加入0.5mL的細(xì)胞提取物（如果是純的Cdc42蛋白則每個管中加入的蛋白量為1ug）。

2. 每個管中加入20ul 0.5M EDTA(終濃度即為20 mM)。

3. 一個管中加入5ul的100X GTPγS（終濃度即為100 uM）作為陽性對照。另一個管中加入5ul的100XGDP（終濃度即為1 mM）作為陰性對照。

4. 將離心管置于30°C條件下反應(yīng)30min并不斷攪動。

5. 終止反應(yīng)：將管置于冰上并加入32.5ul 1M MgCl2(終濃度即為60mM)。

基因符號：RAB11

說明：抗活性Rab11小鼠單克l隆抗l體

背景：Rab系列的小GTP酶是控制膜運(yùn)輸?shù)臋C(jī)械的關(guān)鍵要素。 Rab11已顯示可控制通過回收內(nèi)體的運(yùn)輸。

免l疫原：活性Rab11的重組全長蛋白

應(yīng)用范圍：IP，IHC

推薦的稀釋液：IP：1μg，用于1?2 mg總細(xì)胞蛋白

IHC：1：50?100稀釋

濃度：1 mg / ml

格式：液體

同種型：IgG2b

純度：從腹l水中純化

存儲緩沖區(qū)：

防腐劑：否

成分：PBS（不含Mg2 +和Ca2 +），pH 7.4、150 mM NaCl，50％甘油

種屬反應(yīng)性：抗活性Rab11抗l體識別來自脊椎動物的活性Rab11。

儲存條件：儲存于-20°C。 避免凍結(jié)/解凍周期

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