目的:同時(shí)測定提取三七總皂苷后的母液中人參皂苷R g1,R h1的含量.方法:采用反相高效液相色譜法測定三七總皂苷中人參皂苷Rg1,R h1的含量.色譜柱:M erck L i L ichro CART(r)C18(125 mm×4mm,5μm,德國).流動(dòng)相:乙腈-水(19:81,19:81,40:60,19:81和19:81)用80 min的時(shí)間梯度洗脫.流速:1 m l/m in,檢測波長為203 nm,柱溫35oC.用外標(biāo)法計(jì)算.結(jié)果:三七總皂苷母液中人參皂苷Rg1的含量為23.07%,平均回收率為100.03%,RSD為0.49%;人參皂苷R h1的含量為12.05%,平均回

關(guān)鍵詞：

人參皂苷Rg1、Rh1；反相高效液相色譜法

   淫羊藿為小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicornum Maxim、箭葉淫羊藿Epimediumsagittatum(Sieb. Et Zucc.) Maxim、柔毛淫羊藿Epimedium pubescensMaxim、巫山淫羊藿Epimedium wushanense T.S.Ying或朝鮮淫羊藿Epimedium koreanumNakai的干燥地上部分。2005版《中國藥典》一部收載的含量測定方法，一要是采用紫外分光度法測定總黃酮的含量，二是采用高效液相色譜法測定其淫羊藿苷的含量。有關(guān)淫羊藿及其制劑中淫羊藿苷的含量測定方法主要有高效液相色譜法、薄層掃描法等。
    一、高效液相色譜法
    2005版《中國藥典》淫羊藿含量測定項(xiàng)下：
   色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水（30：70）為流動(dòng)相；檢測波長為207nm。理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不得低于1500。
   供試品溶液的制備：取本品葉片粉末約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇20m，稱定重量，超聲處理1小時(shí)，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
    文獻(xiàn)報(bào)道的HPLC法主要的流動(dòng)相系統(tǒng)有：
    A：乙腈-水
    ①　Waters 515 高效液相色譜儀(Waters 公司)；MetachemKromasilC18色譜柱(4.6mm×250mm,5μm)；流動(dòng)相為乙腈-水(26：74)；檢測波長270nm；柱溫35℃。
    ②Angilen 1100 液相色譜儀；色譜柱Nova-pak250mm×4.6mm,10μm)C18柱；乙腈-水(26：74)為流動(dòng)相；檢測波長為270nm。
   ③HP1100型高效液相色譜儀(美國)；色譜柱為C18柱(4.6mm×250mm),大連依利特科學(xué)儀器有限公司提供；流動(dòng)相：乙腈-水(30：70)；檢測波長270nm；柱溫室溫。
   ④島津LC-2010高效液相色譜儀；C18反相柱(150mm×4.6mm,島津公司)；柱溫40℃；流動(dòng)相：乙腈-水(25：75)；檢測波長270nm。
    ⑤Agilent 1100 series 高效液相色譜儀；ApolloC18 (250×4.6mm,5μm)；流動(dòng)相：乙腈-水(26：74)；柱溫室溫；檢測波長270nm。
    B：乙腈-磷酸溶液：
    ①Waters 高效液相色譜儀；YWG-C18柱(4.6mm×150mm,10μm,北京分析儀器廠)；流動(dòng)相乙腈-0.05%磷酸溶液(33：67)；檢測波長270nm；柱溫室溫。
    ②美國SSI PC2002 高效液相色譜儀；色譜柱Diamonsil C18(4.6×250mm,5μm)；流動(dòng)相為乙腈-水(用磷酸調(diào)pH值至3.0)(30：70)；柱溫35℃；檢測波長270nm。
    ③SP-1000高效液相色譜儀；色譜柱ODS-C18 (4.6mm×200mm,5μm)；流動(dòng)相0.075mol/L磷酸溶液-乙腈(用三乙醇胺調(diào)節(jié)pH值為6.6)(74：26)；檢測波長270nm；柱溫37℃。
    C：甲醇-醋酸溶液：
    ①日本島津SPD210A高效液相色譜儀；ODS柱,10μm,250mm×4mm。流動(dòng)相：甲醇-水-冰乙酸(60：40：0.5)；柱溫30℃；檢測波長270nm。
    ②P200 Ⅱ型高效液相色譜儀；色譜柱為Hypersil ODS2(250mm×4.6mm,5μm,大連依利特科學(xué)儀器有限公司)；流動(dòng)相為乙腈-0.4%醋酸水溶液(25：75)；檢測波長為270nm；柱溫為室溫。
   樣品溶液一般以甲醇、稀乙醇為提取溶劑，凈化處理一般用聚酰胺柱或C18小柱處理；也有用正丁醇-碳酸氫鈉、-醋酸乙酯等試劑萃取。
    另外，韓海建立復(fù)方骨寶片中有效成分淫羊藿苷含量的高效液相色譜測定法。采用Shimazdu高效液相色譜儀；色譜柱Shimpack ODS (4.6mm×250mm, 5Lm)；流動(dòng)相為乙腈-0.02mol/L磷酸二氫鈉溶液(32：68)；檢測波長為254nm；柱溫30℃。